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人巨细胞病毒检测方法的比较 (MedicalJoumM.ftheChinesePeoplesArmedPoliceForces)Vo1.20N..062009-06出版551 人巨细胞病毒检测方法的比较 郭志强李军综述徐德兴审校(武警北京总队第二医院检验科,北京100037;2广州军区总医 院检验科,广州510010) 【关键词】人巨细胞病毒检测方法感染状态比较进展 【中国图书分类号】R373.9R392.1 人巨细胞病毒(Humancytomegalovirus,HCMV)是人类 疱疹病毒组中最大的一种病毒,由162个壳粒,正20面体构 成,有典型的疱疹病毒结构.HCMV在人群中感染非常广 泛,在我国成人感染率可达80%～97%.感染者可长期 或间隙地经口腔,生殖道,胎盘,输血或器官移植等多途径, 由唾液,乳汁,血液,尿液,精液,子宫分泌物等多种介质携带 排出病毒进行传播.绝大多数成年感染者通常呈隐性感染, 多无临床症状,但当机体免疫功能低下,如妊娠,多次输血, 器官移植,获得性免疫缺陷等时,病毒可被激活而发生显性 感染.病毒可侵入肺,肝,肾,唾液腺,乳腺等其他腺体,以 及多核白细胞和淋巴细胞,侵袭多个器官和系统可引起严重 疾病,也是器官移植失败的主要原因之一.该病毒在人体内 感染的普遍性,感染后潜伏及再激活感染方式等,都给临床 病毒感染的早期诊断带来了很大困难.下面就目前HCMV 检测方法的灵敏性,特异性及简繁性进行比较. 1病毒的生物学特性 健康个体初次感染HCMV后通常无症状,并可以在宿 主体内终生持续存在.然而,初次感染和潜伏状态的HCMV 的活化,对于处于免疫抑制状态的移植受体和HIV患者而 言则可以导致严重的后果.这也使得许多研究机构研究了 许多的导致HCMV从潜伏到活化的诸多机制,为临床早期 诊断HCMV在人体的感染状态找到更为有效的手段提供帮 助. 1.1结构特点HCMV具有典型的疱疹病毒(HSV)形态, 其DNA结构与HSV的相似,比HSV大5%.具有一个长单 一 序列(u1)和短单一序列(Us).HCMV以等分子浓度的4 个异物体存在,至少编码氨基酸残基数100以上的多肽200 余种,包括原始基因产物,中间产物及终末产物. 12HCMV基因转录的时相性HCMV基因的转录及翻 译受其自身及宿主细胞的调控,并具有时相性,分即刻早期 (IE),早期(E)和晚期(L),整个复制周期48～72h_3J. 作者简介:郭志强,男,1971年出生.硕士研究生,主管技师.主要从 事临床检验工作. (1)IE期:HCMV感染后0—2h,不需预先合成病毒蛋白, 通过细胞RNA多聚酶Ⅱ,立即转录合成IEP,该期无病毒 DNA复制,编码IEP的基因位于ul区0.66—0.77基因单 位处,少量IEP的基因位于长重复序列0.01—0.035和 0.795—0.825基因单位处及ul的0.2—0.260基因单位 处,HCMVAD169株至少含IE.,IE,IE,三个外显子,编码 四组IEP即IEP】,IEP2,IEP和IEP4.IE1编码68及72 kDu即IEP和IEP2两种蛋白质.MIEP能抑制IE增强子 激活,对自身起负调控作用,但可促进E及L基因的启动 子与病毒DNA多酶及RNA多聚酶Ⅱ作用,使其产生正调 控作用.(2)E期和L期:HCMV感染后2～4h,病毒 DNA尚未复制,此时为E期,此时病毒的RNA能与DNA的 许多区域发生杂交,最富集的区域位于UL区的0—0.046 基因单位处.早期蛋白(EP)是重要的功能蛋白,其主要作 用之一是与合成病毒DNA多聚酶,诱导病毒DNA复制有 关HCMV感染后36—48h,病毒DNA复制开始并合成晚期 蛋白,该蛋白是形成病毒结构蛋白的主要成分,此时为L 期,该期以大量病毒结构蛋白产生及感染性毒粒释放为其 特征. 1.3基因型的变异性增加了判断检测结果的复杂性HC— MV抗原性是相对稳定的,但在某些基因位点上也易发现变 异』,UL和US的连接点是出现变异的主要部位,并且HC— MV基因片段多,各个保守基因片段连接部分也是HCMV出 现变异的主要部位,HCMV各感染株间的序列同源性为 80%.许多研究均发现,gB基因组虽高度保守,但基因组内 定区域在不同毒株间仍存在变异.有学者分别对HCM— VUL55,U157,UIZ6,UL122四个基因在感染人群的变异性和 单个患者体内的变异性进行了PCR和酶切检测,结果显示 人群中UL55基因片段的PCR阳性率和酶切阳性率都较低, 而UL57,UL86,UL122的检出率较高且基本相等,说明HC— MV各基因变异也存在差异.某些基因在单个患者的治疗 过程中也存在较大的变异性,对于单个患者个体来说,在疾 病的进展和治疗过程中,病毒会产生一定的变异,这