施肥对茶园土壤N素和N素转化微生物及脲酶活性的影响.docVIP

PAGE PAGE 1 施肥对茶园土壤N素和N素转化微生物及脲酶活性的影响 　　摘要：以茶园土壤为研究对象，通过添加尿素、有机肥，探讨该两种肥料对茶园土壤的N素、N素转化微生物及酶活性的影响。结果表明，茶园土壤施加尿素能促进土壤氨化细菌、亚硝化细菌、反硝化细菌的生长繁殖，施加有机肥则促进霉菌的生长繁殖；茶园土壤施用尿素能使土壤速效氮快速增加，且能维持在一个较高的水平；茶园施用尿素能刺激土壤微生物分泌脲酶，施用有机肥脲酶活性增加表现出滞后现象。茶园施肥若将两种肥料混合施用，能促进各类微生物生长繁殖和土壤肥力的提高。 　　关键词：有机肥；尿素；茶园土壤；酶活性；微生物 　　中图分类号：S571.106.2文献标识码：A文章编号：0439-8114（2013）08-1768-03 　　茶树是人工栽培的经济灌木，在亚热带气候的地区被广泛种植。土壤植茶后，由于茶树生物物质循环及施肥管理等因素，土壤理化性质会发生一系列明显的变化，并逐渐在茶园土壤中富集，形成了非常独特的土壤化学环境[1]。茶园土壤的肥力对茶叶品质影响很大，土壤肥力与施肥耕作密切相关，土壤微生物和酶在土壤养分转化、有机质的分解——土壤肥力的形成与演变过程等方面起着重要的作用[2，3]。探讨茶园主要施肥种类——尿素和有机肥对茶园土壤N素、N素转化微生物及酶活性的影响，旨在为茶园土壤肥力转化和演变提供理论依据和实践参考。 　　1材料与方法 　　1.1土样采集 　　茶园土样于2011年9月采自安徽休宁县，植茶年限约40年，铲去表土层4～5cm，采样深度5～20cm。土样装入白色无菌大塑料袋中，及时带回实验室进行处理。 　　1.2土样处理 　　将土样充分揉碎，过2mm筛，混合。取一定量混合土样测定含水量及其所含的微生物，一部分土样风干留作理化性质和酶活性测定用，其余土样分装入3个带盖的无菌塑料桶中，每桶5kg。设计两个试验处理，第1处理为尿素处理，尿素施入量为2g/（kg土）；第2处理为有机肥处理，有机肥施入量为5g/（kg土）；尿素与有机肥均溶于200mL无菌水中，以喷雾方式施入土中；对照处理则喷施200mL无菌水。于室温下培养，每隔15d分别取样，测其含水量、微生物各生理群数量及风干土的理化性质。 　　1.3土壤理化性质和酶活性的测定方法 　　将土样风干处理后测定其化学性质，其中有机质用重铬酸钾外加热法测定；速效氮用碱解扩散法测定；脲酶用苯酚钠-次氯酸钠比色法测定[4，5]。 　　1.4土壤稀释液的制备 　　称取土壤10g，加入装有玻璃珠的100mL无菌水中，振荡20min，制成10-1g/mL土壤稀释液，再分别稀释得到10-2、10-3、10-4、10-5、10-6g/mL土壤稀释液，每个稀释度的稀释液设3个重复。所有操作在超净工作台上以无菌操作的方式进行。 　　1.5土壤微生物区系及微生物生理群的测定 　　微生物数量测定采用稀释涂布菌落计数法，其中氨化细菌采用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基；霉菌采用马丁氏孟加拉红培养基。细菌在30℃培养3d计数，真菌在28℃培养5d计数；亚硝化细菌采用亚硝酸细菌分离培养基，反硝化细菌采用反硝化细菌分离培养基，该两类细菌的数量采用液体分离法在30℃下培养14d后计数，结果以3次重复数量指标表计算其数量[6]。 　　2结果与分析 　　2.1不同处理对土壤微生物数量的影响 　　2.1.1不同处理对土壤氨化细菌数量的影响由表1可知，氨化细菌在培养的前15d，数量呈快速上升的趋势且达到最大值，其原因是实验室培养改善了土壤的通气条件，满足了好气性氨化细菌的生长；在培养的前30d氨化细菌数量尿素处理最多，对照处理次之，有机肥处理最低；培养30d后由于养料的消耗各处理菌数都呈下降趋势，但有机肥处理下降较为缓慢且最多。这是因为尿素给土壤微生物提供的是一种速效性氮养料，有机肥则提供给土壤微生物一种缓释而持久的营养， 　　2.1.2不同处理对土壤霉菌数量的影响由表2可知，3个处理霉菌数量在0～75d培养时间内增长变化趋势基本相同，在前15d呈快速上升的趋势，与霉菌好气性有关；在15～75d霉菌的数量均稳定在一个高位水平上，且有机肥处理的霉菌数量远远大于其他两处理。 　　2.1.3不同处理对土壤亚硝化细菌数量的影响由表3可知，在0～15d时，菌落数都呈增长趋势，尿素处理亚硝化细菌数增长幅度远远大于有机肥处理和对照处理，这是由于尿素被土壤脲酶分解大大增加土壤中氨的含量，为亚硝化细菌提供了大量的营养底物；由于在第15天左右各类微生物数量均快速上升，快速消耗土壤中氨，15d后亚硝化细菌由于营养底物的不足，其数量呈快速下降趋势。 　　2.1.4不同处理对土壤反硝化细菌数量的影响反硝化细菌是一类兼性厌氧微生物，在通气良好的试验条件下，该类菌能快速增殖。由表4可知，土壤经粉碎