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第42讲 微生物的利用;;;1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其_________的营养基质。
(2)营养组成:一般都含有_______________和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及_____________的要求。
(3)种类:按照物理性质可分为_____培养基和固体培养基。
2.无菌技术
(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止__________的方法。
(2)关键:防止_________的入侵。;(3)不同对象的无菌操作方法(连线);3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
①操作步骤
②倒平板的方法及注意事项
a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:______________。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是_________。
c.丁中的操作需要等待_____________才能进行。;(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤是_____。
③常用的微生物接种方法有两种
a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面___________的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的_________,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。;系列稀释操作(如下图所示):
涂布平板操作(如下图所示);(3)菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种,可以采用_________的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用_________的方法。;1.判断下列说法的正误
(1)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上( )
(2)培养基分装到培养皿后进行灭菌( )
(3)从有机废水中分离分解有机物的微生物时,接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养( )
(4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害( );(5)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质( )
(6)下图中甲为平板划线法中最重要的环节,乙为操作的结果:
①每一次划线后都要将接种环灼烧( )
②除第一次划线外,每一次划线的起点都是第一次划线的末端( )
(7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形成单个菌落( );2.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请思考:
(1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么?
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种现象?;题组一 培养基及其制备方法分析
1.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是( )
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基
B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨
C.该培养基缺少提供生长因子的物质
D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用;2.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的
嗜热菌,其筛选过程如右图所示。
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,
配制时要加入_____作为凝固剂,从用途来看属于
选择培养基,应以_____作为唯一碳源。
(2)配制固体培养基的基本步骤是( )
A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板;2.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的
嗜热菌,其筛选过程如右图所示。
(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地_____,
防止琼脂糊底引起烧杯破裂。对培养基灭菌的
方法一般为_____________。
(4)①过程是_____,②过程所使用的接种方法是_________法。
(5)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放_______分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,挑选相应的菌落,接种到Ⅱ号培养基进一步分离纯化后,再对菌种进行_____培养。;题组二 无菌技术的操作
3.微生物培养过程中,要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作,防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是( )
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
②接种操作要在酒精灯火焰附近进行
③无菌繁殖脱毒苗时,植物的外植体要进行消毒
④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌
⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌
⑥加入培养基中的
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