第八章-发育毒性及其评价.pptVIP

二、异常发育的细胞学机制 （一）细胞死亡 不同的组织对细胞死亡的敏感性也各不相同，如前脑神经上皮细胞对高热引起的细胞死亡异常敏感，而心脏和卵黄囊则对细胞死亡具有耐受性。 免疫抑制剂环磷酰胺等化学物定向作用于增殖的细胞，首先导致细胞周期的改变，进而引起细胞凋亡。反之，维甲酸等发育毒物通过增加某些组织区已有的细胞程序性死亡，而引起发育异常。研究表明，接触维甲酸引起正常细胞死亡区域的死亡率增加，过多的细胞死亡则导致脊柱裂、指（趾）缺陷、颅面畸形。 二、异常发育的细胞学机制 （二）细胞增殖 同细胞死亡一样，细胞增殖速率下降可减少组织细胞的数量，并影响后期的生长与分化。细胞增殖率下降既可能源于细胞周期进程的趋缓，也可能源于生长因子的缺乏、诱导因子的不足和细胞对外部因子反应性的降低。 研究表明，抗癫痫药物丙戊酸、免疫抑制剂环磷酰胺等可通过干扰DNA合成而改变细胞周期的进程。小鼠体内研究发现，丙戊酸引起的细胞周期阻滞可能涉及神经上皮核糖核苷酸还原酶的改变，并与丙戊酸引起的神经管缺陷有关。 二、异常发育的细胞学机制 （三）细胞信号通路的改变 细胞信号通路是肧体模式形成及分化的基础，也是决定发育毒物细胞病理机制的重要环节。信号通路通过分泌时空特异性分布的细胞产物来控制形态发生过程。其下游生物学事件通常为转录水平的改变，并导致靶细胞基因表达的变化。无论是改变信号分子的分泌，还是改变信号分子的转导，均可引起形态发生过程的实质性改变。信号转导的改变通常包括受体、转录因子、下游信号分子等的表达和间隙连接的分布这两个方面。 二、异常发育的细胞学机制 （三）细胞信号通路的改变 发育毒物可通过诱发分化诱导子的缺乏，通过诱发影响到细胞分化、细胞增殖、死亡的靶细胞的缺失，通过信号分子生物合成的障碍，或通过干扰信号向靶细胞的传递，而改变形态发生过程中的细胞信号通路。 实际上，多种环境化学物导致的出生缺陷的细胞病理机制都牵涉到细胞信号通路的改变。细胞毒药物可改变多条信号通路，而某些受体介导的致畸原，如维甲酸，则仅改变特定的信号通路。维甲酸可改变小鼠肧体的AER-EGF-4-ZPA信号通路，进而诱发肢体缺陷。 二、异常发育的细胞学机制 （四）影响细胞迁徙与分化 在肧体发育早期，神经冠从神经褶背侧的神经上皮发育而来。在囊胚分层及上皮-间质转化的过程中，神经冠细胞脱离神经上皮，并开始迁徙；其后经过广泛的迁徙，神经冠细胞逐步分化为面部结缔组织、外周神经组织成分及黑素细胞等。 由于神经冠细胞的迁徙分化对多种组织器官的发育必不可少，若发育毒物干扰这一迁徙分化过程（如抑制细胞骨架的形成），势必会造成肧体发育的广泛性受损。例如，维甲酸通常要参与后脑神经冠细胞命运的确定过程，然而，在较高的浓度下，维甲酸可改变神经冠细胞的特性，导致迁徙模式的变化和靶组织的结构畸形。 维甲酸 维A酸是体内维生素A的代谢中间产物。 适应症：寻常痤疮、特别是黑头粉刺皮损，老年性、日光性或药物性皮肤萎缩，鱼鳞病及各种角化异常及色素过度沉着性皮肤病、银屑病。 第四节 发育毒性的评价 发育毒性的评价 流行病学调查 动物发育毒性试验 发育毒性的预筛试验 一、发育毒性的流行病学调查 流行病学研究的目的： 寻找出生缺陷的原因 有助于了解出生缺陷的发展趋势 引起公众对出生缺陷的注意 二、动物发育毒性试验 主要试验方案： 1.三段生殖毒性试验主要用于评价药物的生殖发育毒性。 1966年美国食品与药品管理局（FDA）首先提出，后经多次改进，我国食品药品监督管理局（SFDA）规定的新药生殖发育毒性试验也参照此方案。 2.一代和多代生殖毒性试验主要用于评价食品添加剂、农药及其他化学物的生殖发育毒性。 由美国环境保护局（EPA）首先提出。 3.改进的大鼠发育神经毒性的试验程序。 1988年EPA发布。 连续、完整的生殖发育过程的六个阶段 A.从交配前到受孕：检查成年雄性和雌性生殖功能、配子的发育与成熟、交配行为、受精。 B.从受孕到着床：检查成年雌性生殖功能、胚胎着床前发育、着床。 C.从着床到硬腭闭合：检查成年雌性生殖功能、肧体发育、主要器官形成。 D.从硬腭闭合到妊娠结束：检查成年雌性生殖功能、胎体的发育与生长、器官的发育与生长。 E.从出生到断乳：检查成年雌性生殖功能、新生仔对宫外生活的适应性、断乳前的发育与生长。 F.从断乳到性成熟：检查断乳后的发育与生长、对独立生活的适应、达到完全的性功能。 三段生殖毒性试验 主要是根据以上发育阶段的区别来设计的，每一段试验大致相当于上述两个阶段。 Ⅰ段：生育力和早期胚胎发育毒性试验 （一般生殖毒性试验） Ⅱ段：肧体-胎体毒性试验（致畸试验） Ⅲ段：出生前后发育毒性试验 （围生期毒性试验） 三段生殖