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- 2019-10-25 发布于广西
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第一节 细胞分离 一、重力沉降 重力沉降是化工过程中常用的气固、液固和液液分离手段,在生物分离过程亦有一定程度应用。 以液固沉降为例 1、球形粒子的Stokes沉降速度 2.对于非球形粒子,可用当量直径代入计算沉降速度。再根据颗粒的形状系数对计算值进行校正。 颗粒形状系数定义为 3.当颗粒浓度较大时,颗粒间相互碰撞干扰,沉降速度比单一颗粒小。 4.菌体和动植物细胞的重力沉降简单易行。由于菌体细胞体积小,沉降速度很慢,实际应用时需加入中性盐或高分子絮凝剂(如聚丙烯酰胺或聚乙烯亚胺),提高沉降速度。 机理:中性盐可是菌体表面双电层排斥电位降低,有利于菌体凝聚。高分子絮凝剂使菌体之间架桥作用而形成较大凝聚颗粒。 二、离心沉降 离心沉降速度 2、离心分离法 (1)差速离心分级(Differential centrifugation) 生化工业中最常用的离心分离法,细胞的分离为一级分级分离。实际应用中据实际物系的特点、分离目的和所需分离程度,选择适当的离心机转数和时间,可使料液中不同组分得到分级分离。 (2)密度梯度(区带)离心 差速区带离心:调配的密度梯度中的最大密度小于待分离的目标产物的密度。 离心操作中,料液中的各个组分在密度梯度中以不同的速度沉降,根据各个组分沉降系数不同的差别,形成各自的区带。 平衡区带离心:调配的介质密度梯度比差速区带离心的密度梯度大。
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