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首都师范大学 本科生科学研究与创业行动项目立项申请书 项冃类另壯 一定向资助项目 项 目 名 称：通过酵母双杂筛选拟南芥CML24相互作用蛋白一 项冃负责人： ［王苏 所在（院）系： 生命科学学院 项冃负责人电话： 项目负责人信箱： 439351846@ 指导教师： 李怎攻 指导教师职称： 特聘教授 指导教师单位：「 首都师范人学生命科学学院 首都师范大学 填表日期: 填表日期: 2014 年4 月 8 日 填表说明 写《申请书》前，请先查阅《首都师范大学本科生科学研究与创业行 动项目管理办法（试行）》和相关通知。 《申请书》各项内容，必须实事求是，表达要明确严谨，并要求用钢 笔填写（或打印）。对于填写不合要求、内容含糊不清、字迹潦草者, 不予受理。 上报的《申请书》一式八份（两份原件、六份复印件）。 该《中请书》为A4纸，双面打印。 项目信息 项目名称 与拟南芥CML24相互作用蛋白的筛选 项冃类别 及属性 □…般项目 □定向资助项目 □延续资助项冃 □指南类项EI □自选项13 □创业项13 项忖所属一级学科 生物学 以往项冃信息（延续资助项冃必填） 项忖名称 项目级别 项冃负责人姓名 联系方式 学号 项II指导教师姓名 联系方式 职称 二、项目申请人情况 项 目 负 主 贝 人 姓名 王苏 性别 女 学号 1120800029 所在院（系） 生命科学学院 专业、班级 生物科学、师范 身份证号电了邮箱 439351846@ 联系电话及手项目组其他成员 姓 名 性别 学号 所在院（系） 专业、班级 联系电话 手机 邮箱 身份证号  分工 签字 姓 名 性别 学号 所在院（系） 专业、班级 联系电话 手机 邮箱 身份证号 分工 签字 姓 名 性别 学号 所在院（系） 专业、班级 联系电话 手机 邮箱 身份证号 分工 签字 姓 名 性别 学号 所在院（系） 专业、班级 联系电话 手机 邮箱 身份证号 分工 签字 指导教师 姓名 李乐攻 性别 男 年龄 51 所在院系 生命科学学院 最终学历 博士 专业 职称 特聘教授 职务 联系电话手机 研究方向 细咆^omg 电子邮箱 lglil 1242006@giR 身份证号 4301M196303052536 三、申请人对研究项目简要说明 （一）立项依据（项目的背景、理论与实际意义、国内外现状分析） 钙（62+）信号涉及植物响应不同的刺激，例如触摸，光，病原体入侵，温度, 激素以及二氧化碳。拟南芥（Arabidopsis thalianci）中的CM厶（calmodulin-like）基因家 族编码的蛋白含有保守的钙结合结构域（EF hands）,是潜在的钙信号的传感器。拟 南芥中CML24 （TCH2）与CaM （calmodulin）具有44%的序列相似性，其基因表达 受到黑暗，伤害，高低温以及其他多种刺激的诱导。并且CML24的不表达会导致对 外界离子浓度不敏感，对脱落酸刺激不敏感，以及在常日照下开花时间的延迟。而对 其两个点突变突变体的（cml24?2 Gly67Glu以及cml24-4 Glul24Lys）研究主要集中在 主根相应机械力，自噬进程以及免疫信号的研究。之前的研究主要是在描述其突变体 的表型，并没有深入的涉及其参与钙信号的机理。CML24的缺失突变会导致众多的 表形，说明其功能涉及到众多的钙信号途径，研究与其相互作用的蛋白可以揭示其参 与哪条钙信号途径，使对其功能的本质有进一步的了解。 （-）研究目标、内容、拟解决的关键问题（包括实验方案的设计、技术路线等） 通过酵母双杂的技术手段筛选拟南芥中与AtCML24互作的蛋白，借助实验室多年研究钙信 号的基础了解CML24参与哪条钙信号途径，其互作蛋口中是否存在未知的钙离子通道。构建含 有CML24全长基因的pGBKT7-CML24质粒一导入酵母菌株Y190-进行自激活检测一转入AD 文库质粒一提取酵母质粒转入人肠杆菌扩繁一测序一进行点对点验证 （三）硏究的进度安排 4月?5月：了解CML24基因背景了解技术方法（阅读文献） 6月?7月：准备实验材料 6月?7月：提取拟南芥RNA逆转录并扩增CML24基因以及构建pGBKT7-CML24 质粒 7刀月：pGBKT7-CML24转入酵母，自激活检验以及文库筛选。 9月?10月：提取酵母质粒 10月?11丿丄质粒扩繁并测序 11 W-12 比对测序结果 12月?（2015年）3月：进行点对点验证 （四）成果形式: 项冃成果形式研究报告的方式展示，并力争能够发表 （五）项目创新特色概述（5（）字以内） 作为一个潜在的钙信号感受器，本项目