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茶叶蛋白质提取及初步纯化研究（江南大学食品学院，天锡 !#$%）王洪新 胡昌云公司提供及自制茶渣 茶叶蛋白质提取及初步纯化研究 （江南大学食品学院，天锡 !#$%） 王洪新 胡昌云 公司提供及自制茶渣；酒石酸亚铁 剂二厂；磷酸二氢 钠 、磷 酸 氢 二 钠 分析纯，宜兴试 分 析 纯 ，上 海 新 摘 要：以 制 取 茶 多 酚 之 后 的 茶 渣 （含 !’()!*( 的 蛋 白 质 ）为 原 料，通过优化提取条件用 +,%-$，./01 浓度 $-!$231 4 5 的 水溶液，料液比（6 4 7）8’ 于 !’9下搅拌提取 #:，离心、 过滤后用等电点沉淀;盐析法沉淀蛋白质，并经丙酮脱 色、超滤脱盐、真空干燥后得到含茶蛋白 -’(的浅绿或 灰白色蛋白质产品，提取得率为 %-(，初步纯化得率为 =-$(，对低档茶及碎茶的综合利用和开发新蛋白质资源 作了初步探索。 关键词：茶蛋白，提取，纯化 华化工厂；盐酸 分析纯，上海试剂一厂；硫酸二铵 分 析纯，上海金山化工厂；2345627 8)#9 :45;5=5 公司；其它有机或无机试剂药品 均为分析纯。 ?@9$ABC)( 型微量紫外可见分光光度计 江 苏泰州无线电仪器厂；DE)* 数字计流仪、!8F)%+8 台式离心机、G)%$$ 自动部分收集器 上海沪西仪 器厂；色谱柱（%+H%$$）上海锦华仪器厂；:I)*J 型 精 密 3I 计 上 海 雷 磁 仪 器 厂 ；K )% 组 织 捣 碎 机 、 +9%% 型电动搅拌器 上海标本模型厂；IL)* 水循 环真空泵 河南巩义市杜甫仪器厂；AB)#,$ 紫外分 光光度计 日本岛津；MD 系列温度控制器 上海电 机（集团）公司实验电炉厂；其它。 !#$%’$(!# $%’() *#+ ,’%#-’. /%0 ’1 $23$1)2 4 /% ’# 2#5+ %+(.6+ *(’1 *#’% +26’()7 !1 $’(0(8. ,’%#-’() -).(’() *#+ $9:7; =#2 ;7?;02 @ A ?BC ’# 2#5+ @ *#’% +26’()DE @ FGHIB +’(%%()J #’ K; % @ 0() /% L17 !1 ,’%#-’() +26’() *#+ -)’%(/6J. /(2’%#’. #). ’1) $%-($(’#’. M3 (+2-’%(- $()’4+#2’ $%-($(’#’() 0’1.7 !1 ’# $%’() $%-($(’#’ *#+ .-26%. M3 #-’) +25)’ .+#2’. M3 62’%#/(2’%#’() #). ’1) .%(. 6).% 5#-660 ’ M’#() 2(J1’ J%) % J%3(+1 *1(’ $%’() $*.%7 !1 ,’%#-’() 3(2. 实验方法 $%! / ’# $%’() *#+ :K7NO #). / $%2(0()#%3 $6%(/(-#’() / PH7;O7 ’1 %-5%3 %#’ ’# $%’() *#+ %#% 分析测定方法 含水量的测定：%$*N#O 恒量 法0#1；茶 灰 分 的 测 定 ：99$N#9O 恒 重 法0#1；茶 叶 总 糖 的 测定：蒽酮) 硫酸法0*1；茶多酚含量的测定：酒石 酸 亚 )*+ ,-%.#(’# $%’()Q ,’%#-’()Q $6%(/(-#’() 中图分类号：!#$%#’% 文献标识码：( 铁分光光度法 ；茶叶咖啡碱的测定：沉淀)分光光度 0,1 文 章 编 号 ：%$$#)$*$+（#$$,）%#)$$+-)$, 法0#1；茶 叶 蛋 白 质 的 测 定 ：凯 氏 定 氮 法0#1；产 品 （中 间 品）蛋白质含量测定：强化（I#P#）凯氏定氮法091。 %## 茶叶蛋白质提取 %##% 工艺流程 茶渣!水提取剂!组织捣碎机破碎细 胞!搅拌，加热提取!纱布过滤!离心过滤 4 抽滤!蛋白质提 取液 %### 提取条件单因素实验 3I 对提取率（提取液离心后上清液含氮量占茶 渣原料中含氮量比例）的影响 用 IJQ 调节水溶液 3I， 分 别 取 3I#$R*$R,$R9$R+$R@$R/$R-$R%$$R %%$， 温 度 #$O ， 料 液 比 （S T B）% U9，V5JQ 浓 度 为 $#$WQ T F，搅拌（+$; T X）提取 #$4。 温度对提取率的影响 温度分别取 %$R%9R#$R#9R *$R*9R,$