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高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸韦淑毅1，2，钟其顶2，高红波2，邢江涛2，王道兵2 高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸 韦淑毅1，2，钟其顶2，高红波2，邢江涛2，王道兵2，熊正河2，*，王岁楼1，* （1.中国药科大学，江苏 南京 210009；2.中国食品发酵工业研究院，北京 100027） 摘 要：建立了高效液相色谱法测定富硒酵母中硒代蛋氨酸的分析方法。采用酶解提取法提取富硒酵母样品中的硒 代蛋氨酸，丹磺酰氯柱前衍生，C18 色谱柱（4.6 mm×250 mm i.d., 5 μm）分离，以 10 mmol/L 磷酸二氢钠缓冲液（含 4 % N，N-二甲基甲酰胺，pH=6.55）和乙腈为流动相进行梯度洗脱，荧光检测（激发波长：320 nm；发射波长：523nm）。硒代 蛋氨酸的检出限为（S/N=3）1 μg/L，定量限为（S/N=10）5 μg/L。在 1 mg/L~50 mg/L 范围内的线性关系良好（R≥0.999 6）。 加标回收率在 91.12 %~107.83 %，方法相对标准偏差＜1.2 %。本方法具有专属性好，灵敏度高，适用于富硒酵母原料 及相关产品中的硒代蛋氨酸的定量测定。 关键词：富硒酵母；硒代蛋氨酸；丹磺酰氯；高效液相色谱法 Determination of Selenomethionine in Selenium-enriched Yeast by Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography WEI Shu-yi1, 2, ZHONG Qi-ding2, GAO Hong-bo2, XING Jiang-tao2, WANG Dao-bing2, XIONG Zheng-he2, * , WANG Sui-lou1, * （1. China Pharmacutical University, Nanjing 210009, Jiangsu, China; 2. National Research Institute of Food Fermentation Industries, Beijing 100027, China） Abstract：The high performance liquid chromatography detection methods for selenomethionine in selenium - enriched yeast is established, which utilizes protein enzymes for selenomethionine extraction, dansyl chloride for derivatizaiton, C18 reverse column (4.6 mm ×250 mm i.d., 5 μm) for seperation, 10 mmol/L phosphate buffer solution and acetonitrile for gradient elution, fluorescent detector (λex: 320 nm; λem: 523 nm) for determination. The detection limit (S/N=3) is 1 μg/L, and quantification limit (S/N=10) is 5 μg/L. Detection of 1 to 50 mg/L selenomethionine produces a linear response (R≥0.999 6) and the recovery is quantitative around 91.12 %- 107.83 %, the RSD1.2 %. The present methods is speficitive, sensitive ,economatic and accurate, and be used in the determination of selenomethionine for the selenium-enriched yeasts materials and relating products. Key words: selenomethionine; selenium-enriched yeast; dansyl chloride; hige performance liquid chromatography 硒（Selenium，Se）是人体必需微量元素，存在于 抗氧化酶和甲状腺素代谢酶的活性中心[1-2]，缺硒导 致克山病，合理补硒可有效减少人类及动物罹患癌 症