病毒感染的检查方法与防治.ppt

病毒感染的检查方法与防治原则 第25章 第一节 病毒感染的检查 一、标本的采集与送检 用于分离培养的标本： a、采集急性期标本 b、采集感染部位标本 c、冷藏 血清学诊断的标本： 急性期和恢复期双份血清，-20℃保存 二、病毒的分离培养与鉴定 （一）病毒的分离培养 1.最常用细胞培养 2.鸡胚接种：主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用：主要用于狂犬病病毒、 乙型脑炎病毒的分离 常用的细胞培养 （二）病毒在细胞内增殖的指标 1.细胞变化 CPE、多核巨细胞、包涵体 2.红细胞吸附 3.干扰现象 4.细胞代谢改变 病毒在细胞内增殖的指标 正常细胞 病变细胞 ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落 1细胞病变效应(cytopathic effect, CPE) 麻疹病毒感染细胞 呼吸道合胞病毒感染细胞 ②形成多核巨细胞或称融合细胞 ③形成包涵体(inclusion body) （三）病毒数量和感染性测定 1、蚀斑试验 2、ID50 或 TCID50 病毒感染鸡胚、动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量。 病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑，蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。 三、病毒感染的血清学诊断 四、病毒的快速诊断 （一）形态学检查 （二）检测病毒抗原 抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原 （三）检测病毒抗体已知抗原测血清中抗体测IgM，或动态测IgG（双份血清） （四）检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术 病毒感染的检查 检测内容 查病毒 查特异性抗体 病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察 光镜检查包含体 分离培养 . 第二节 病毒感染的特异性预防 灭活疫苗（inactivated vaccine） 活疫苗（living vaccine） 重组载体疫苗（recombinant carrier vaccine） 亚单位疫苗（subunit vaccine） 化学提取或人工合成疫苗 重组疫苗（recombinant vaccine） 核酸疫苗（nucleic acid vaccine） 一、人工主动免疫常用生物制品 二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂 IFN-α、β、γ 细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的杀伤细胞 ——LAK细胞 人工被动免疫 （artificial passive immunization） 如：1.血清免疫球蛋白 用于甲肝、麻疹、脊髓灰质炎预防 2.高效价含乙肝病毒表面抗体的免疫 球蛋白 用于预防母婴乙肝传播 策略：阻断病毒复制周期中吸附穿入、 脱壳、核酸复制、或装配释放 任一环节，从而抑制病毒复制 要求：抗病毒药物能穿入细胞选择性地 抑制病毒复制又不损伤宿主细胞 第三节 病毒感染的治疗 核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂  其他抗病毒药物 干扰素和干扰素诱生剂 中草药 基因治疗剂 治疗性疫苗 抗病毒化学制剂 反义寡核苷酸 干扰RNA 核酶（ribozyme） 一、药物治疗 1.核苷类药物 2.病毒蛋白酶抑制剂 3.天然药物如中药 二、基因治疗 1.反义寡核苷酸 2. 核酶 3.干扰RNA 三、免疫治疗 1.中和抗体（单抗）2.治疗性疫苗3.干扰素 一、药物治疗 （一）核苷类药物 1.抑制病毒基因复制 碘尿苷(疱疹净)用异常嘧啶取代胸腺嘧啶,眼疱疹病毒感染。也可渗入细胞DNA,故有毒性。 无环鸟苷(啊昔洛韦) ，竞争病毒复制酶。 2.抑制病毒基因转录： 病毒唑 （二）蛋白