微生物学通报四株杂交鳢致病性舒伯特气单胞菌特性及致.pdf

微生物学通报 Oct. 20, 2019, 46(10): 2630−2644 Microbiology China DOI: 10.13344/j.microbiol.china.180925 tongbao@ /wswxtbcn 研究报告 四株杂交鳢致病性舒伯特气单胞菌特性及致病性比较 1,2 1 *1 1 1,2 1 1 何山 谭爱萍 姜兰 赵飞 刘付翠 张瑞泉 邓玉婷 1 中国水产科学研究院珠江水产研究所 农业部渔用药物创制重点实验室 广东省水产动物免疫技术重点实验室 广东 广州 510380 2 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306 摘 要：【背景】舒伯特气单胞菌为革兰氏阴性短杆菌，是一种人-畜-鱼共患的条件性致病菌，它能 引起不同程度的人类疾病，近年来更是在水产养殖中被频繁报道。【目的】比较分析4 株杂交鳢源舒 伯特气单胞菌(WL-4 、ZL-1 、ZL-13 、D075) 菌株间生理生化特性、致病性以及对常用药物的敏感性 差异，为水产舒伯特气单胞菌病的防治提供参考依据。【方法】使用全自动细菌生化鉴定仪检测菌株 的生理生化特性；运用PCR 扩增和测序比对菌株的gyrB 、16S rRNA 基因序列；采用改良平板法检 测毒力因子表达，PCR 技术检测菌株毒力基因和耐药基因的携带情况；通过人工注射感染分析4 株 舒伯特气单胞菌对杂交鳢的致病性差异；并采用微量二倍稀释法测试 15 种抗菌药物对菌株的最小抑 菌浓度。【结果】以ATCC43700 (人源舒伯特气单胞菌)作为参考，4 株菌株理化特性基本相同，gyrB 和 16S rRNA 基因一致性分别为 99.57%和 100%，聚类分析聚为一簇；不同的舒伯特气单胞菌 (ATCC43700 、WL-4 、ZL-1 、ZL-13 、D075)均具有溶血性、蛋白酶活性和脂肪酶活性；但人源菌株 (ATCC43700)与杂交鳢源舒伯特气单胞菌携带的毒力基因存在差异，其中人源菌株携带了hlyA 、ela 、 lip 、ahal 、act ，而杂交鳢源菌株(WL-4 、ZL-1 、ZL-13 、D075)携带hlyA 、ela 、lip 、ahal 、aer；4 株 杂交鳢源舒伯特气单胞菌对杂交鳢致病性存在差异，1.2×105 CFU/mL 浓度腹腔注射感染健康杂交 鳢，WL-4 、ZL-1 、ZL-13 、D075 对杂交鳢的感染致死率依次为30% 、40% 、70%和80%；不同菌株 (ATCC43700 、WL-4 、ZL-1 、ZL-13 、D075)的药物敏感性以及携带的耐药基因也存在差异。【结论】 4 株杂交鳢源舒伯特气单胞菌在致病性、药物敏感性等方面存在差异，研究结果有助于进一步开展 舒伯特气单胞菌病发病机制和防控技术研究。 关键词：舒伯特气单胞菌，毒力因子，致病性，药物敏感性 Foundation items: Guangdong Provincial Fishing Port Construction and Fishery Industry Development Special Project (A201601B07); China Agriculture Research System (CARS-46); Central Public-interest Scientific Institution Basal Research Fund, CAFS (2017HY-ZD1004) *Corresponding author: E-mail: jianglan@ Received: 18-11-2018; Accepted: 18-02-2019; Published online: 02-04-2019 基金项目：广东省渔港建设和渔业产业发展专项(A201601B07) ；现代农业产业技术体系专项资金(CARS-46) ；中国水 产科学研究院基本科研业务费(2017HY