《右归饮对大鼠骨髓间充质干细胞增值的影响》-毕业论文（设计）.docVIP

南通大学毕业设计（论文） PAGE PAGE 9 右归饮对大鼠骨髓间充质干细胞增值的影响 课题背景：骨髓间充质干细胞(BMSC)是一种来源于骨髓的成体干细胞，具有自我更新和多向分化潜能，在不同诱导条件下可以分化为成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、脂肪细胞、肝细胞等中胚层细胞。中药是我国的民族瑰宝。近年来的研究表明中药在促进MSC增殖与定向分化上有积极作用。 目的意义：右归饮载于《景岳全书》，由熟地黄、山药，制附子、肉桂、杜仲、枸杞子、山茱萸、甘草组成，功能温补肾阳，主治肾阳不足之气怯神疲、腰肢冷脉细症。中医认为：肾主骨生髓。因此，我们拟研究右归饮对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响。 文献综述与调研报告：（阐述课题研究的现状及发展趋势，本课题研究的意义和价值、参考文献） 骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells，MSCs)是一种存在于骨髓内的成体干细胞。近年来已成为干细胞领域的研究热点，它不仅支持造血系统，在一定条件下还具有向成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经元细胞等中胚层细胞分化的能力[1]，同时还具有自我更新的能力[2]。在组织工程和细胞治疗方面有着广阔的应用前景。 中药是我国的民族瑰宝。近年来的研究表明中药在促进MSC增殖与定向分化上有积极作用。右归饮载于《景岳全书》，由熟地黄、山药、山茱萸、肉桂、制附子、枸杞子、杜仲、甘草组成，方中熟地益肾填精；山药健脾固肾益精；山茱萸补肝益肾固精；肉桂温肾，补命门之火；附子峻补元阳，益火之源；杞子补肝肾，益精气；杜仲具有温补肾阳之功能。中医认为：肾主骨生髓。因此，我们拟研究右归饮对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响。 近年来中药对于MSCs的研究已经受到了国内外研究者的普遍关注，其研究方向主要包括以下几个方面：1）右归饮对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓骨活性影响[3]。2）右归饮对体外成骨细胞增殖和分化影响[4]。3）骨髓间充质干细胞生物学特性的研究[5]。4）大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化与鉴定[6]。5）人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定[7]。6）中药对骨髓间充质干细胞增殖与分化影响[8]等。主要集中于各种不同的中药在浓度和药效上对MSCs的不同影响，研究已有一定的进展。 本实验欲通过中药在不同浓度情况下对大鼠骨髓间充质干细胞的不同影响以初步确定其效力强弱。通过对实验大鼠进行为期三天的灌喂[9]，灌喂结束后通过心脏取血，并提取血清，成为含药血清。取大鼠骨髓间充质干细胞，使用不同浓度含药血清进行培养，观察其增殖的程度，用MTT法检测其细胞活力。最终由实验得出中药对骨髓间充质干细胞增殖的影响。 [参考文献：] 叶丙霖，李盛华，李小宏，中药对间充质干细胞增值与分化影响的研究进展.甘肃中医，2008,21（1）：14-15. Jiang Y, Jahagirdar BN, Reinhardt RL, et al. Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow[J]. Nature, 2002, 418(6893):41-49. 吴云刚，肖鲁伟，童培建.右归饮对激素性股骨头坏死患者股骨近端骨髓骨活性影响的实验研究，中国骨伤，2009，2(22):2 俞索静，肖鲁伟，吴承亮.右归饮对体外成骨细胞增殖和分化影响的实验研究，浙江临床医学，2004，12(6):12 柯金勇，林艳娟.骨髓间充质干细胞生物学特性的研究，医学综述， 1006-2084(2008)15-2241-04 卢仁荣，陈良龙，江琼等.大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化与鉴定，心肺血管病杂志，2008，7(27):4 戴文达，方涛林，李熙雷等.人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定，复旦学报(医学版)2008 May,35(3) 叶丙霖，李盛华，李小宏，中药对间充质干细胞增值与分化影响的研究进展.甘肃中医，2008,21（1）：14-15. 肖鲁伟，武中庆，季卫锋等.右归饮诱导胎兔骨髓基质细胞向软骨细胞分化的实验研究，中国中医药科技，2005，5(12):3 摘 要 目的　研究右归饮对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法 采用全骨髓培养法分离大鼠股骨、胫骨、肱骨骨髓细胞，进行体外培养。骨髓间充质干细胞（BMSCs）经过原代培养及传代培养后添加右归饮或右归饮含药血清进行培养,利用MTT法测定细胞活力，从而分析不同浓度的右归饮药物及含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖作用。结果 通过MTT检测的结果与正常组进行对比并通过电脑绘制成图，可以看出15%和10%的右归饮含药血清是具有抑制作用，而在5%和1%时具有促进作用，右归饮药物具有明显的诱导大鼠骨髓间充质干细胞增殖的功能