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中心实验室提供微生物学实验教学课件目 录实验一 培养基的配置、分装和灭菌实验二 环境中微生物的检测和菌落识别实验三 微生物的纯种分离实验四 细菌染色法和光学显微镜的使用实验五 微生物的间接计数法——水中细菌总数的测定实验六 放线菌和真菌的培养和形态观察实验七 微生物显微镜直接计数法实验八 细菌芽孢染色法实验九 微生物生长量的测定和生长曲线的绘制实验十 物理、化学因素对微生物生长的影响实验十一 细菌鉴定中的生理生化反应实验十二 食用菌菌种的分离和制种技术实验十三 环境中细菌分离鉴定综合实验Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 注意事项 思考题Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验目的 明确培养基的配制原则； 掌握配制培养基的一般方法和步骤； 了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用范围； 掌握高压蒸汽灭菌技术，了解几种常用灭菌方法。Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验原理 培养基是按照微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的各种营养物质，用人工方法配制而成的一种基质。 培养基的种类繁多，根据培养基的成分、物理性状不同，可分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基、固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 灭菌是指应用物理或化学的方法，杀灭物体表面和内部一切微生物营养体、芽孢和孢子。有干热灭菌法和湿热灭菌法。Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验器材 药品和试剂： 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、10％NaOH溶液、10％盐酸溶液。 器材： 天平、药匙、瓷缸、玻璃棒、电炉、 PH试纸、试管、三角瓶、分装漏斗、牛皮纸、棉花、线绳、干燥箱、高压锅。Page 称 量溶 解定容，调pH分装，包扎灭 菌实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法培养基的制备过程：若有不溶物则要求过滤Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 实验方法高压蒸汽灭菌，121℃灭菌20分钟Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 注意事项 称取药品时严防药品混杂，一把牛角匙称一种药品； 蛋白胨极易吸湿，称取动作要迅速； 配制固体培养基时，先将其他药品加热溶解到快沸时，再将称好的琼脂加入，继续加热至琼脂完全熔化，要求不断搅拌，以免糊底，并防止沸腾外溢； 分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培养基装量约为管高的1/5，液体培养基约为管高的1/4，三角瓶不超过瓶体的1/2 ； 分装时不要将培养基沾在管（瓶）口上，以免引起污染。Page 实验一 培养基的配置、分装与灭菌 思考题1.思考牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培养基？2.为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效？Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验目的 实验原理 实验器材 实验方法 实验结果 注意事项 思考题Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验目的 掌握各种微生物接种的基本操作技术； 初步了解周围环境中微生物的分布状况； 熟悉四大类微生物菌落的形态特征。Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验原理 在我们周围环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物，他们很小，人们用肉眼看不到，将他们在一定的温度下培养一段时间，可繁殖成一个个肉眼可见的细胞群体，就可以进行鉴别。 接种是指在无菌操作条件下，将某种微生物的纯种移接到适合微生物其生长的新鲜培养基中或生物体内的一种操作过程。 实验室常用的接种方法有斜面接种、穿刺接种、三点接种和液体接种。Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验器材 菌种： 实验室环境微生物、大肠杆菌、酿酒酵母、放线菌及霉菌。 培养基： 马铃薯固体培养基、牛肉膏蛋白胨固体培养基、高氏一号固体培养基 其他： 无菌培养皿、无菌棉签、火柴、超净工作台及恒温培养箱。Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法斜面接种Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法液体接种接种环斜面液体培养基 将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或滴管接种。Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法穿刺接种 用接种针挑取菌种后，插入固体培养基内（不要刺到底部），再沿原路拔出。 此法用于厌气性细菌接种、检查细菌的运动能力。Page 实验二 环境中微生物的监测与菌落识别 实验方法平板接种（1）斜面接平板a.划线法：见平板划线分离法。b.点种法：常用于观察霉菌和酵母细胞，轻点在平板的表面（根霉点一点，曲霉、酵母可点3-4点）。?