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种子制备
种子扩大培养: 将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。
种子罐级数: 各种种子在种子罐中逐级扩大培养的次数。
接种龄:种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。
双种法:采用二只种子罐接一只发酵罐。
倒种法:以适宜的发酵液倒出适量给另一发酵罐作种子。
实消:分批灭菌 将培养基置于反应器中用蒸汽加热,达到预定灭菌温度后维持一定时间,再冷却到发酵温度,然后接种发酵,这叫分批灭菌。
连消:连续灭菌 将培养基在向发酵罐等培养装置输送的同时进行加热、保温和冷却的灭菌方法就是连续灭菌。
发酵工业用种子需要满足什么条件?
①菌种细胞的生长活力强,移种至发酵罐后能迅速生长,迟缓期短;②生理性状稳定;③菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求;④无杂菌污染;⑤保持稳定的生产能力。
影响种子质量的因素有哪些?
①原材料质量,水质,培养基pH;
简述发酵工业常用的灭菌方法。②灭菌条件;③接种量;④培养室温度、湿度、通风;⑤培养时间;⑥有害气体或挥发物(培养室内不要安紫外灯);⑦冷藏条件。
连续灭菌的基本设备有哪些 ?
(1)配料预热罐;(2)连消塔;(3)维持罐;(4)冷却管
影响灭菌的因素有哪些?
培养基成分、物理状态、微生物数量、氢离子浓度、微生物细胞中水分、微生物细胞菌龄、空气排除情况、搅拌过程、泡沫
发酵工程设备总体包括:生物反应器、生物反应物料处理、产物的分离纯化设备、辅助系统设备 微生物反应器
微生物反应器设计的基本要求有哪些?
避免将需蒸汽灭菌的部件与其它部件连接,因为即使阀门关闭,细菌也可在阀门内生长;(2)尽量减少法兰连接,因为设备震动和热膨胀会引起连接处的移位,导致染菌。如有可能,应采用全部焊接结构;(3)防止死角、裂缝等一类情况,以避免固体物质在此堆积,形成使杂菌获得热抗性的环境;(4)发酵罐系统的某些部分应能单独灭菌;(5)与反应器相通的任何连接都应采用蒸汽加以密封,如取样口在不取样时也要一直通蒸汽;()所6有阀门要易清洗、易使用、易灭菌;(7)反应器应始终保持正压以排除渗漏;(8)为了便于清洗,反应器主体应尽量简单。
机械搅拌通风发酵罐主要由哪些结构组成,其功能分别是什么?
(a)罐体 (b)搅拌器和挡板① 搅拌器作用:打碎空气气泡,增加气-液接触界面,以提高气-液间的传质速率。其次是为了使发酵液充分混和,液体中的固形物料保持悬浮状态。② 挡板作用:加强搅拌强度,防止液面中央形成漩涡流动,促使液体上下翻动,增强溶氧传质。
气升式发酵罐包括哪些类型,其工作原理是什么?
(1)气升环流式、鼓泡式、空气喷射式(2)无菌空气通过喷嘴或喷孔喷射进发酵液中,通过气液混合物的湍流作用而使空气泡分割细碎,同时由于形成的气液混合物密度降低向上运动,而气含率小的发酵液则下沉,形成循环流动,实现混合与溶氧传质。
简述自吸式发酵罐的充气原理。
搅拌器由罐底向上伸入的主轴带动。叶轮旋转时叶片不断排开周围的液体使其背侧形成真空,由导气管吸入罐外空气。吸入的空气与发酵液充分混合后在叶轮末端排出,并立即通过导轮向罐壁分散,经挡板折流涌向液面,均匀分布。
动物细胞培养反应器有哪几种形式,举出一个例子加以说明。
动物细胞微载体悬浮培养反应器 用微珠做载体,使单层动物细胞生长于微珠表面,并在培养液中进行悬浮培养。这种培养方式是将单层培养与悬浮培养相结合,这是大规模动物细胞培养最有前途的方法。
动植物细胞培养和微生物培养的区别
1.动物细胞没有细胞壁,大多数哺乳动物细胞需要附壁生长;
2.对培养基的营养要求相当苛刻,要求含有多种氨基酸、维生素、无机盐、血清等物料;
3.对培养环境十分敏感,对温度、pH、溶氧浓度等条件都比微生物培养要严格得多;
4.动物细胞对流体剪切力十分敏感,强烈的机械与通风鼓泡所引起的过大剪切力会损伤细胞,使细胞破裂。植物细胞虽然有细胞壁,但对流体剪切力的耐受程度也要比微生物差;
5.由于动植物细胞的生长要比微生物缓慢得多,一般只有在高细胞密度下,才能得到一定浓度的产物;
6.生长慢,又非常容易染菌,因此需要严格的无菌防范措施。
植物和动物细胞培养反应器
比较植物、动物、微生物细胞的结构和生理特点。
性质
动物细胞
植物细胞
微生物细胞
大小
10-100um
比微生物细胞大
10um
代谢调节方式
内部和激素
内部和激素
内部
营养要求
很
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