应用负压气相培养系统生产体细胞克隆牛的研究.pdfVIP

中国农业科学 ≥ ∏∏≥ 应用负压气相培养系统生产体细胞克隆牛的研究 董雅娟 柏学进 李建栋 铃木达行 ⁄∂ 山东莱阳农学院动物胚胎工程中心 莱阳 山口大学农学部连合兽医学研究科 日本山口 2 摘要 以 低温冷冻保存 个月的 和 死亡牛胎儿皮肤上皮细胞 为核供体细 ε ∂2ƒ2 ƒ∏2ƒ2 胞 应用点击去核方法 和 和 湿度负压气相培养系统 负压组 进 !≤ ! ∗ !ε 行了克隆牛试验研究 并与吸引和挤压及常压培养法进行了比较 结果表明 采用点击去核法对体外成熟培养 ∀ 的卵母细胞进行去核 去核成功率分别为 和 组显著高于 组 !! ! Π 极显著高于 组 而且 点击去核法去核率为 极显著地高于吸引法的 Π Π 与挤压法去核率 差异不显著 采用点击去核法囊胚发育率达 显著高于吸引法的 Π 与挤压法的 差异不显著 负压组重构胚的卵裂率达 显著高于常压组的 ∀ Π 负压组囊胚发育率达 极显著高于常压组的 负压组克隆囊胚细胞数为 个 极 Π ? 显著多于常压组的 将第 天的克隆桑椹胚和囊胚每 枚装入 支 塑料细管中 移 ? Π∀ ∗ 植给同期发情处理的 头受体奶牛的黄体侧子宫角中 最终获得 头牛妊娠 并于 年 月 日和 月 日 产 头黑色雌性肉牛 康康 和 双双 通过微卫星 标记确认 克隆牛 康康 为来源于 牛胎儿 / 0 / 0 ∀ ⁄ / 0 ∂2ƒ2 皮肤上皮细胞 双双 来源于