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林业科学研究2012，25(6)：677～684
ForestResearch
文童编号：1001-1498(2012)06-0677-08
吴 涛1’2，张俊红1，韩素英3，杨文华1，李万峰1，齐力旺¨
(1．中国林业科学研究院林业研究所，细胞生物学实验室，北京100091；
2．云南省林业科学院，云南省森林植物培育与开发利用重点实验室，云南昆明65020l
3．中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，北京100091)
摘要：以2年生日本落叶松实生苗为材料构建其小RNA文库，对283个克隆进行POR验证后测序，通过生物信息学
分析鉴定文库中的microRNA并进行qRT·PCR验证。结果表明：(1)小RNA文库的体积为50mL，总库容量为5．25
×106
cfu，重组率为92．6％，插入片段长度约65
miRl60a?miRl62a、miRl64b?miRl65a，miRl66a、miRl66a‘l
功能主要为转录因子、信号转导、胁迫抗性和代谢相关酶及未知功能蛋白，
关键词：日本落叶松；小RNA；文库；miRNA；转录组
中图分类号：S791．223 文献标识码：A
of
ConstructionofSmallRNA andCharacterization
Library
MiRNAsinLar／x
kaempferi
WUTao
1”，ZHANGJun—hon91，HANSu—yin93，YANGWen—hual，LIWan-fen91，QILi—wan91
ofCell Instituteof of
(1．LaboratoryBiology，ResearchForestry，ChineseAcademy 100091，China；
Forestry，Beijing
ForestPlant and of 65020
2，Yunnan Cultivation
KeyLaboratory,for Utilization，YunnanAcademyForestry，Kunming1，Yunnan，China；
3．ResearchInstituteofForest and of
Ecology，EnvironmentProtection，ChineseAcademyForestry，Beijing100091．China)
smallRNA ofneedle androottissueswascon—
this mixed sRNA
Abstract：Instudy，a library equally leaves，stem
for of hundredand threerecombinants
structed
2-year—oldseedlingJapaneselarch(如吨kaempferi)．Twoeighty
from were selected and weresearchedandeom—
librarypaaially randomlysequenced．Thesesequencedsequenc
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