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玉环县人民医院检验科 文件编号： JYK-3-SH-016 版本 / 修订号： C/0 主题内容 生化室作业指导书 生效日期：第 1页共 4 页 血清胆碱酯酶测定标准操作规程 1检验申请 单独检验项目申请：血清丁酰硫代胆碱法碱酯酶测定 (缩写 ChE)，组合项目申请：血生化中 肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2标本采集与处理 2.1标本采集 2.1.1 常规静脉采血约2 ml ，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状 态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5 下列标本为不合格标本 2.1.5.1标本量不足：少于 0.3ml 的全血标本，或少于 0.1ml 的血清或血浆。 2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2标本保存 2.2.1 接收标本后在 30min 内将标本离心分离出血清。 2.2.2标本保存时间： 室温（15～ 25℃）下可稳定 24h，普通冰箱中 （2～8℃）稳定 7 天。-20 ℃ 保存稳定 6 个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1 天的标本均加塞密闭或 覆盖湿巾。 2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置 4～8℃冰箱内保存 7 天。 2.3标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和 12h 以上禁食空腹状态。 2.3.2 可以使用 EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。 3 方法原理 Cholinsterase Butyrylthiocholine iodide+H20 ? ? ? ? thiocholine+butyrate, Thiocholine+DTNB ? ? ? 2-nitro-5mercaptobenzoate, 通过测定有色产物 480nm处吸光度的变化速率，求得血清中胆碱酯酶的活性。 4试剂及其他用品 编写 制定日期审核审核日期： 核准执行日期 李永臣 2010-09-15 李永臣 2011-07-01 章林华2011-07-01 玉环县人民医院检验科 文件编号： JYK-3-SH-016 版本 / 修订号： C/0 主题内容 生化室作业指导书 生效日期：第 2 页 共 4 页 4.1 试剂盒名称：胆碱酯酶试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。 4.2 试剂盒保存：未启封试剂盒在 2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂 仓冰箱内稳定 14 天。开盖后避免污染。 4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。 4.4 试剂盒主要成分： R 1：磷酸盐缓冲液 (pH 7.6) 20.0 mmol/L ，5,5 ’- 二硫双亚硝基苯甲酸 0.25 mol/L ；R2：丁酰硫代胆碱 6.0 mmol/L 。含有稳定剂与保护剂。 5 校准品与校准模式 校准品：不使用校准品，以 2- 硝基 -5- 巯基苯甲酸的双波长（ 480/660 nm ）毫摩尔消光系数 计算Che活性。 6 质控品与室内质控规则 6.1 质控品采用由 Beckman-Coulter 公司提供的两个不同水平未定值质控血清。 6.2 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。 6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。 6.4 质控规则：采用 Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。 7 适用仪器 适用 AEROSET和 C16000全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤 装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 →标本测定 → 结果复核 → 报告。 9 主要分析参数 参见说明书。 10 结果计算 ChE(U/L) ＝ΔA/min × K ＝ΔA/min × ( VT / Vs × l × ε × 10 3) 式中ΔA/min 即单位时间中吸光度增高的值， VT为总反应体积 ml（试剂总量＋标本量） ，Vs为标本 体积ml，l 为比色皿光径 cm， ε为pNP的410/670nm波长的毫摩尔消光系数。 K值即因子，本法中 K 值为14852。 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。 11 检验结果的报告及范围 11.1 结果的报告 11.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 11.1.2 报告单上标明结果的计量单