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(二)接合(conjugation);接合——两个亲本细胞通过直接接触来转移遗传物质的基因重组方式。通过接合而获得新性状的受体细胞就是接合子(conjugant)
1946年用E.coli的两个营养缺陷型所作的实验:;研究细菌接合方法的基本原理;A;F因子的存在方式;根据F因子在E. coli中的有无,及与染色体的关系,可将E. coli分为四种类型:;② F+(“雄性”)菌株:
细胞内含有(1~4个)游离的F因子,
细胞表面存在与F因子数目相当的性菌毛。
与F– 相接触时,可通过性菌毛将F因子转移到F– 细胞中,使之也变成F+菌株。 F因子以很高的频率传递,但含F因子的宿主细胞的染色体DNA一般并不被转移。;③Hfr(高频重组,high frequency recombination)菌株:
含有与染色体特定位点整合的F因子。
因该菌株与F– 接合后的重组频率比F+ 菌株高几百倍而得名。
Hfr菌株与F–菌株接合时,Hfr染色体双链中的一条单链在F因子处发生断裂,F因子位于线状单链DNA的两端,整段单链线状染色体从5’端开始等速进入F–细胞,在没有外界干扰的情况下,全部转移过程的完成需要约120分钟。由于种种原因DNA转移过程常会发生中断,所以越是前端的基因进入F– 细胞的机会越大。F因子位于线状DNA的末端,进入受体细胞的机会最小,故这种接合引起转性的频率最低,但可以出现各种重组子。;④F’菌株:
细胞中含有游离的、带小段染色体基因的环状F因子,可与F– 菌株接合,使其成为F′菌株。
F′菌株的形成:由Hfr菌株中的F因子在不正常切离而脱离核染色体组时所形成,并因此造成细胞染色体发生缺失, F因子也缺失一段DNA.
由Hfr异常释放所生成的F’菌株,称为初生F’菌株;
由F– 接受外来F′因子所产生的F′叫作次生F′细胞;
F因子转导F-mediated transduction: 利用F’菌株与F–接合可将供体染色体DNA传入F– 菌株,从而使F– 既获得供体菌的若干遗传特性,又可获得F因子。这种接合方式叫做F因子转导,又称性导sexduction. ——因为F因子可在细菌的染色体多位点整合,所以F因子转导可实现不同基因的转移和重组。;F因子转导(F-duction):;接合的一般过程:;接合中断试验与染色体图:;接合中断试验
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