第六章第二节基因工程及应用上课3.pptVIP

第2节 基因工程及其应用 从大肠杆菌说起 从大肠杆菌说起 一、基因工程 ——分子水平改变生命 * * 淮北市第十二中学高二生物备课组 思考： 1.大肠杆菌能合成人的胰岛素吗？ 2.大肠杆菌能合成干扰素吗？ 胰岛素 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4~5g胰岛素 1979年，利用大肠杆菌的DNA分子重组，2000L培养液 提取100g ， 相当于2吨猪胰腺中提取的量。 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 是对生物的基因进行改造和重新组合，产生人类所需要的基因产物。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状（目的）。 基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶） （一）基因操作的工具 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 特点：特异性。 即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶） 例如：大肠杆菌(EcoRI)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 基因的剪刀——限制性内切酶（简称限制酶） 限制酶 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 基因的针线——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 磷酸二酯键 思考：外源基因(如胰岛素基因)怎样才能导入受体细胞(如大肠杆菌)？ （二）基因操作的工具 导入过程需要运输工具——运载体。 运载体的作用有哪些？ 作用一：作为运载工具，将外源基因(胰岛素基因)转移到受体细胞(大肠杆菌)中去。 作用二：利用运载体在受体细胞(大肠杆菌)内，对外源基因(胰岛素基因)进行大量复制。 常用的运载体主要有两类： 1）细菌细胞质的质粒。 2）噬菌体或某些动、植物病毒。 质 粒： 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位。 质粒是基因工程最常用的运载体。 绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。 大肠杆菌的质粒： 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。 质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内成。 三、基因操作 的基本步 骤 1）提取目的基因。 2）目的基因与运 载体结合。 3）将目的基因导 入受体细胞。 4）目的基因的检 测和表达。 步骤二：提取目的基因 （三）基因操作的基本步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的基因。 直接分离基因 人工合成基因 目的基因的提取方法 步骤二： 目的基因与运载体重组 1）用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个切口，露出黏性末端。 2）用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端。 3）将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）。 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 （三）基因操作的基本步骤 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三：目的基因导入受体细胞 步骤四：目的基因的检测和表达 四环素 抗性基因 氨苄青霉 素抗性基因 二、基因工程的应用 　　运用基因工程技术，不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种，还可以培养出具有特殊用途的动、植物。 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 1、基因工程与作物育种 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 转基因龙胆花色奇异 转基因蓝猪耳改变花色 转基因牵牛花改变了花色 A：紫外光照射下的转绿色荧光蛋白的 Eustoma (Lisianthus) 花。 B：转没有绿色荧光蛋白的空质粒的花， 会发光的转基因鱼 导入贮藏蛋白基因的超级羊和超级小鼠