法氏囊高免蛋卵黄抗体效价的测定.pptVIP

法氏囊高免蛋卵黄抗体 效价的测定 主要内容 一、目的要求 二、仪器及材料 三、方法与步骤 一、目的要求 掌握鸡法氏囊高免蛋卵黄抗体效价的测定方法和判定标准，明确此试验在生产中的应用。 二、仪器材料 玻璃吸管、小烧杯、微量移液器、微量血凝板、培养皿、带盖瓷盘、注射器、琼脂打孔器、酒精灯、温箱、针头、氯化钠、琼脂粉、生理盐水、pH 7.2、0.01mol/L PBS、传染性法氏囊炎琼脂扩散抗原、传染性法氏囊炎标准阳性血清、鸡蛋。 三、方法与步骤 1．取卵黄 用灭菌玻璃吸管吸取卵黄液,置小烧杯中。 2．稀释卵黄 （1）用微量移液器在96孔微量血凝板中加生理盐水，每孔50 μl ，共加1~12孔。 （2）换一吸头吸取50μl液卵黄液，加于第1孔中，并用移液器挤压3～5次使液体混和均匀，然后取50μl移入第2孔,混匀后取50μl移入第3孔,依次倍比稀释到第12孔，第12孔中液体混匀后从中吸出50μl弃去。 3．琼扩试验 （1）琼扩板的制备 称取琼脂糖1.0g，加到100 m1 pH 7.2、0.01mol/L PBS中，在水浴中煮沸或用电炉煮沸充分融化，加入8g氯化钠，充分溶解后加1％硫柳汞溶液1m1。冷至45℃～55℃时，将洁净干热灭菌直径为90mm的平皿置于平台上，每个平皿加入18～20ml，加盖待凝固后，把平