青霉素类药物工业分析和检测工作方式.pptVIP

四、青霉素药物杂质检查 高分子杂质 ——分子量大于青霉素药物本身的杂质总称。 外源性杂质蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。 主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。 杂质分类：基本特点－对青霉素而言,青霉噻唑多肽－外源性的（2400～3500）青霉素聚合物－内源性的（聚合度）母核参与的聚合反应－N型聚合反应,侧链参与的聚合反应－L型聚合反应,特点： （1）生产过程中的任何蛋白或碎片都可带入产品中，易与药物形成多肽类杂质 （2）形成的聚合物也可发生不同程度的降解 （3）异构体之间可以相互聚合－L-L、D-D、L-D （4）高分子杂质与生产工艺密切相关 高分子杂质的控制方法 1、凝胶色谱－自身对照外标法 *凝胶色谱法：利用凝胶的分子筛作用，让药物分子自由的进入到凝胶颗粒内部，而高分子杂质被排阻的原理进行的。故此大分子则先流出色谱柱，小分子后出峰而得以分离。 *分析方法：1、HPLC系统 2、简单测定系统3、色谱适用性条件：（1）蓝色葡聚糖在高分子分离中的 N＞2500/m，拖尾因子0.75～1.5（2）峰面积的RSD＜5％ 2、分子排阻色谱法 【检查】青霉素聚合物 填充剂 葡聚糖凝胶G-10（40~120μm） 流动相A 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） [0.1mol/LNa2HPO4-0.1mol/LNaH2PO4(61:39)] 流动相B 水 流速 1.5ml/min 检测波长 254nm 对照溶液的制备 取青霉素对照品适量，精密称定，加水制成100ug/ml 溶液，摇匀。以流动相B测定。供试品溶液，取供试品适量，精密称定，加水制成，20ug/ml进样。以流动相A测定。按外标法以峰面积计算。（自身对照外标法）含聚合物按青霉素计，不得超过0.3%。 3、 分光光度法： 取本品，加水制成每1ml中含1.80mg的溶液，照紫外-可见分光光度法，在280nm的波长处测定吸光度，不得大于0.10；在264nm的波长处有最大吸收，吸光度应为0.80~0.88。 式中，A表示吸收度；T表示透光率； 表示百分吸光系数（比吸光系数），即溶液浓度为1％，液层厚度为1cm时的吸收度；C表示100mL溶液中所含被测物质的质量，g；L表示液层厚度，cm。 五、青霉素毒性检测 青霉素类药物工业分析与检测方法 生物工程一班 小组成员： 周春媛 庄超 戚嘉卓 抗生素类药物专题 第一部分： 青霉素类药物生产工艺 菌种优化 抗生素发酵及 提取精制 工业生产方法 及总的工艺 抗生素生产菌 的菌种 菌种来源 内 容 速 览 抗生素总的生产工艺过程 菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液预处理及过滤 出厂检验 提取过程 成品包装 精制过程 成品检验 微生物合成抗生素 下游： 提取 预处理 过滤 进一步提取 菌种保存、选育、孢子及种子制备 发酵——适宜的培养基 碳源 氮源 无机盐（微量元素） 前体 上游： 结晶干燥 纯品 成品: 制剂工作 ★发酵控制 1）发酵时间：视抗生素品种和发酵工艺而定。 2）溶 氧：在整个发酵过程中，需不断通无 菌空气和搅拌，以维持一定罐压或溶氧。 3）控制灌温：在罐的夹层或蛇管中需通冷却水以维持一定罐温。 4）消 泡： 加泡沫剂以控制泡沫，必要时还加入酸、碱以调节发酵液的pH。 成品检验 《中华人民共和国药典》 抗生素成品常规检验的主要项目有： ①鉴别实验：用化学或生物方法证明是何种抗生素； ②效价测定：测定有效成分的含量； ③毒性试验：限制产品中的致毒杂质 ⑤水分测定：限制过高水分以免影响稳定性； ④无菌实验：检查有无杂菌污染； ⑥pH测定：规定水溶液的酸碱度，保证产品稳定 和临床的安全应用； 第二部分：青霉素类药物的分析与检测 （一）、鉴别实验 一、化学结构与性质 1、化学结构 ①?? 青霉素类结构 N S R C O N H C H 3 C H 3 C O O H O 1 2 3 4 5 6 7 青霉素类: 氢化噻唑环或氢化噻嗪环与β-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母体：6-APA、 7-ACA。 母核: 由?-内酰胺环和氢化噻唑环 组成的双杂环。 6-APA 6-Aminopenicillanic Acid 侧链 : RCO-　　 2、性质 青霉素类和头孢菌素类结构共同特点具有?-内酰胺