培养基的质量控制.docxVIP

、 、 惠山疾控 作 业 指 导 书 编号：HSCDC/GC-76-2009 惠山疾控 培养基质量控制规程 版本 / 修改次：1/0 惠山疾控 培养基质量控制规程 第 1 页 共 6 页 1.目的 规范本中心微生物实验室培养基的内部质量控制工作。 2．适用范围 适用于实验室微生物培养基使用前的质量验收、使用过程中的质量控制。 3. 职责 3.1 检验人员：按照本规程规对培养基使用前及使用过程中进行质量控制，确保培养基 符合相关标准的要求。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员对培养基进行质量控制。 4．使用前的质量控制 4.1 生产企业提供的材料 培养基生产厂家随产品应提供下列文件： 培养基、独立成分、添加成分名称；批号；使用前的 pH；储藏信息和有效期；性能评价和 所用测试菌株；技术数据清单；质控证书/必要的安全、危害数据。 4.2 验收 实验室收到培养基后，应填写“培养基验收检查记录单”，检查包装及完整性，标识是否 清晰等，验收合格后按照“培养基编码系统使用规程”对培养基进行编号。 4.3 贮存及使用前质量确认 4.3.1 商品化培养基应严格按供应商提供的贮存条件、有效期进行贮存。 4.3.2 验收合格的培养基应建立“商品化干粉培养基目录清单”，使用前对容器密闭性进 行复查。 4.3.3 开封的脱水培养基，每次使用前应对其质量进行检查，通过粉末的流动性、均匀性 结块情况和色泽变化等判断培养基的质量变化。若发现培养基受潮或物理性状发生明显改 变则不应再使用。 4.3.4 制备好的成品培养基应建立“ 成品培养基目录清单”，每次使用前应检查：颜色是 否发生变化?/是否蒸发/脱水?/是否有微生物生长 ?等。如果发生上述异常情况，则不应再使 用。 5．制备好的成品培养基的质量控制 新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试，符合要求后使用。 成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试，根据测试结果及时 填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。 5.1 物理指标控制 5.1.1 测试 20℃～25℃的 pH 值 5.1.2 琼脂层厚度；色泽；透明度和（或）是否存在肉眼可见杂质；凝胶稳定性、粘稠度和 湿度。 5.2 微生物学指标控制 可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法（详见表 1-表）对培养基性能进行测 试，具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南”。 5.2.1 微生物污染的控制 从每批制备好的培养基中选取至少一个（或 1%）平板或试管，置于 37℃或按特定标准 中规定的温度培养 18h。 5.2.2 生长特性 5.2.2.1 生长率 惠山疾控 作 业 指 导 书 编号：HSCDC/GC-76-2009 惠山疾控 培养基质量控制规程 版本 / 修改次：1/0 惠山疾控 培养基质量控制规程 第 2 页 共 6 页 将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中，每种培养基上菌 株的生长率应达规定的最低限值。 5.2.2.1.1 定量方法 生长率 PR 的计算： PR = NS/NO NS：从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。 N ：从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数（该菌落总数应≥100cfu ）。 要求：非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为 0.7，该类培养基应易于目标菌生长； 选择性培养基上目标菌的生长率最低应为 0.1；每平板（或每试管）的接种水平为 10CFU～100CFU。 5.2.2.1.2 半定量方法 半定量方法采用生态测量技术在平板上划线，平板板连续划线区域得分的总和即为生 长指数 G，G 值不应超过标准规定的允许范围。 5.2.2.1.3 定性方法 定性方法采用划线法观察。 5.2.2.2 选择性 将浓度为 10 CFU/mL～10 CFU/mL 的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和 参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值。 5.2.2.2.1 定量方法 选择因子 S ： S = D - D S DO：能在参考培养基上生长至少 10 个菌落的最高稀释度 DS：能在测试培养基上显示生长的最高稀释度 要求：非目标菌在选择性培养基上的 SF 至少为 2 ；半定量和定量法中，非目标菌应部分 或全部被抑制。 5.2.3 生理生化特性（选择性和特异性） 规定培养基的基本特性，使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特 性（菌落形态、大小等）和非目标菌的被抑制程度进行测试。 5.3 性能评价和结果解释 按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定，则该批培养基品质优良；若只有物理 指标和微生物指标符合规定，则该批培养基可被接收。 表 1 计数用选择性培养基 培养基 用途 培养条件 测试菌株 判定标准 特征反应 参考培 控制 养基