葡萄籽化学成分分析及其抗氧化性质的研究_许申鸿.docVIP

葡萄籽化学成分分析及其抗氧化性质的研究 * 许申鸿　杭　瑚　郝晓丽 ** (青岛大学化学系,青岛266071 摘　要　分析了葡萄籽中氨基酸及矿质元素等化学成分的含量,结果表明,葡萄籽中氨基酸含量丰富,矿质元素 中K 、P 、Ca 、Fe 、Zn 、M n 等营养元素含量较高。抗氧化实验表明,葡萄籽丙酮浸提液对超氧阴离子自由基(O -　·　2和1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(D PP H ·均有较强的清除作用。经薄层色谱分离得到两种抗氧化组分,简单定性实验推测 其中一种组分可能为黄酮类化合物,另一种可能为不饱和类化合物。 关键词　葡萄籽　化学成分　抗氧化 Abstract 　T his pa per analy sised the chemical constit uent in g ra pe seed such as amino acids a nd mine ral elements,T he r esults sho wed tha t the amino acids a nd nutritio n elements like K ,P.Ca,Fe,Zn,M n etc.ar e rich in g rape seed .The a ntiox idatio n ex pe riment results show ed that th e scav eng ing effects of th e acetone ex tr acts of g rape seed o n super ox ide radica l(O -　 ·　2 a nd 1,1-Diph eny 1-2-picr y1-hydra zy 1(DP PH ·a re stro ng.Tw o constituents with antio xida tio n capability w ere separ ated fr om the aceto ne ex tr acts o f g rape seed by T L C ,by simple qua litativ e analysis , o ne may be flav onoid,and the o ther may be unsatura ted co mpo und. Key words 　g ra pe seed ;chemical co nstituent ;antioxidatio n *　山东省自然科学基金资助课题(Y98DO2050。**本校99届毕业生。 　　葡萄籽中大约含有14%~17%的油。以往人们 对葡萄籽油食疗价值的研究较多,王敬勉等报道了葡 萄籽油的理化性质及营养成分等[1] ,但对葡萄籽整体的性质研究不多见,尤其是葡萄籽清除自由基作用的研究未见报道。为此,本文较系统的分析了葡萄籽的化学成分,并考察了它对活性氧超氧阴离子自由基(O -　·　2以及稳定自由基1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH ·的清除作用。1　材料与方法1.1　材料与仪器 　　葡萄籽浸提液　为市售新鲜葡萄去肉、皮质剩物,洗净,自然凉干,用粉碎机粉碎,于冰箱存放。准确称取一定量的样品,加一定量的溶剂于40℃下恒温振荡浸提6h ,离心,将上清液定容,即为葡萄籽浸提液。于冰箱存放,用时逐级稀释;邻苯三酚　贵州遵义市第二化工厂,A.R 级,以10mmo l /L HCI 配制;1,1-二苯基-2-苦肼基自由基　DPPH ·日本东京化成 工业株式会社,以无水乙醇配制;硅胶G 　青岛海洋化工厂 C.P 级。 722型分光光度计　上海第三分析仪器厂产品;pHS -2型数字酸度计　上海第二分析仪器厂。1.2　成分分析 　　水分测定　常压加热干燥法[2] ; 灰分测定　灼烧法; 粗脂肪测定　索氏提取法[4]; 粗蛋白测定　凯氏定氮法,N ×6.25[5];粗纤维测定　重量法测定[6]; 氨基酸含量测定　采用日立835-50型氨基酸分析仪,HCl 水解法测定17种氨基酸含量; 矿质元素含量测定　采用ICP(电感偶合等离子体发射光谱仪法。1.3　抗氧化实验 1.3.1　O -　·　 2的清除实验　用Marklund 法[7],向p H8.2,2.8m L 50m mol /L Tris-HCl 缓冲液中加入0.1m L 葡萄籽浸提液(空白实验以等量葡萄籽浸提溶剂代替,于25℃保温10min,然后加入0.1m L25℃预温的60mmol /L 邻苯三酚(空白实验以等量10mmo l /L HCl 代替,总体积 3.0m L,迅速摇匀,倒入1cm 比色杯中,在420nm 处,每隔半分钟测一次420nm 处吸光值,用 2.8m LTris -HCl 缓冲液、0.1m L 10mmo l /L HCl 及0.1m L 葡萄