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分子荧光法测定维生素B的含量 PAGE PAGE 1 ———————————————————————————————— 作者： ———————————————————————————————— 日期： 【实验项目】 分子荧光法定量测定维生素B2的含量 【实验目的】 掌握标准曲线法定量分析维生素B2的基本原理。 了解荧光分光光度计的基本原理、结构及性能，掌握其基本操作。 【实验原理】 荧光是光致发光。任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱,发射波长总是大于激发波长。荧光激发光谱是通过测定荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱，反映不同波长激发光引起荧光的相对效率。荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光，是荧光强度对发射波长的关系曲线，表示在所发射的荧光中各种波长相对强度。由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长，可用它来鉴定荧光物质。有些发荧光的物质其荧光强度与物质的浓度成正比，故可用荧光分光光度法测定其含量。 维生素B2溶液在430~440nm蓝光的照射下，发出绿色荧光，荧光峰在535nm附近。维生素B2在pH＝6~7的溶液中荧光强度最大，而且其荧光强度与维生素B2溶液浓度呈线