植物病害诊疗技术应用.pptVIP

徒手切片的基本用具是剃刀或刀片。 切片时以左手的食指和姆指捏住材料，中指顶住材料下端，使材料上端突出于手指以上2—3毫米。 右手握稳刀，从左向右后方斜向切割。 注意刀口必须以材料面垂直，否则所得切面不正。 同时双手不应紧靠身体，而是要活动自如。 用臂力均匀地沿刀口后部起拉向前方，连续切割4—5片后，用毛笔蘸水轻轻沿刀口取下，放入盛有水的浅玻皿中，在此过程中左手握着的材料不要放下，否则再切时难按原位置拿材料。 此外，在切片过程中，必须常用毛笔蘸水湿润材料，以免材料干涸不便切割。 切割一定数量的薄片后，用移置环在浅玻皿中选取合用的材料薄片，放在载玻片的水滴中，镜检合格者即酒精灯上将水烘干并摆正材料，然后加一滴乳酚油或其浮载剂；放在展片台上略加热，镜检如无气泡，即可小心加盖片，用吸水纸吸除多余的浮载剂，最后贴好标签，平放于切片板上，待干燥适宜时封固。 徒手切片的缺点是对于微小或过大，柔软、多汁、肉质及坚硬的材料不易切取，也难制成连续切片，此外切片的厚薄也难一致。切片机切片即可克服这些缺点。 项目一 植物病害诊断技术概述小结 一、作物病害诊断的步骤 田间观察——症状——镜检——病原分离、培养、接种。 二、作物病害诊断技术 植物病害的症状观察与描述 病原物鉴定 谢 谢！ （一）非传染性病害的识别 病 原 鉴 定 1、化学诊断法：土样分析、测其营养成分。（对缺素症及盐碱害有效） 2、人工诱发及排除病因的检验法： 对可疑病因，人为地提供发病条件或采取治疗的办法观察病害的发生条件。 3、指示植物鉴定法：用于缺素症的鉴定。（指示植物是该植物缺某一营养元素其症状表现出来。） 诊断方法：现场调查、排除侵染性病害、治疗诊断。 非侵染性病害的主要特点： （1）没有病征。 （2）成片发生。 （3）没有传染性。（4）可以恢复。 （二）传染性病害的识别 1、田间观察：呈分散状分布，由点到面，由一个发病中心向四周扩展，有传染性。 2、症状鉴别：传染性病害一般有病征。 3、发病以后不能恢复 4、病原鉴定 （1）常见病害诊断：症状鉴别—镜检病原—查阅资料 （2）少见病害诊断：分离培养—接种—再分离 （柯赫氏证病律----Koch’s Rule) ①在病植物上常伴随有一种病原生物存在； ②该病原生物可在离体的或人工培养上分离纯化而得到纯培养； ③将纯培养接种到相同品种的健株上，表现出相同症状的病害； ④从接种发病的植物上再分离到纯培养，性状与原来的记录②相同。 （二）传染性病害的识别 四、病害诊断注意事项 1、病害症状的复杂性 不同植物、或在同一植物不同部位、不同发育时期、不同的环境条件。 不同植物、或在同一植物不同部位、不同发育时期、不同的环境条件。 同一病原 症状可不一样 不同病原 症状可相同 四、病害诊断注意事项 2、伤害与病害的区别 伤害包括虫害、雹害、风害等机械损伤 虫害如螨类、蚜虫等可使叶变色、卷曲等不能与病害混淆 四、病害诊断注意事项 3、病原菌与腐生菌的区分 植物受病原菌侵染，前期感染了病原菌、后期感染了腐生菌，镜检时要区分开来。 4、并发性病害与续发性病害的区别 并发性病害——当植物发生一种病害时的同时，有另一种病害伴随发生。如柑桔线虫病发生时常并发衰退病发生。 续发性病害——当植物发生一种病害后，可继续发生另一种病害。感染苹果花叶病的果实常发生炭疽病。 五、植物病原鉴定技术 植物病原菌的分离和培养 (一）植物病原真菌的分离 1、分离材料的选择 2、分离方法： （组织分离法) （二)植物病原真菌的培养 1、培养基的制备 2、病原菌接种 3、病原菌培养 （三）观察记录培养性状 分离材料的选择 分离材料的选择对分离培养的成败有着决定的影响，因为在感病植物受害部位的内外，常有多种腐生菌，为减少腐生菌的污染，分离所用的病害材料应尽可能新鲜，并且最好在病、健交接处选材取样。病、健交接处，除材料新鲜，污染的可能性小外，病原菌的生活力强、比较活跃，容易分离成功。 分离方法 病原菌分离的方法因材料不同而异，植病实验室常见的方法有组织分离法和稀释分离法； 其中最常用的方法是组织分离法， 而稀释分离法主要用于病组织上产生大量孢子的病原真菌的分离。 组织分离法 组织分离法适用于大部分病菌的分离。 1.培养皿准备: 取灭菌培养皿1个,置于湿纱布上，在皿盖上注明分离日期、材料和分离人姓名。 2 .培养皿平板制备： 用无菌操作法向培养皿中加入25％乳酸1～2滴(可减少细菌污染)，然后将融化而冷至45℃左右的PDA培养基倒入培养皿中，每皿倒10～15 ml，轻轻摇动使之成平面。凝固后即成平板培养基。 注：分离细菌时不加