CN102600245A桑枝皮中具有抑制α-糖苷酶活性的水溶性生物碱纯化方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局 *CN102600245A* (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 102600245 A (43)申请公布日 2012.07.25 (21)申请号 201210118472.8 A61K 135/00 (2006.01) (22)申请日 2012.04.20 (71)申请人 南开大学 地址 300071 天津市南开区卫津路94 号 申请人 天津中新药业集团股份有限公司隆 顺榕制药厂 (72)发明人 朱元元 朱晓丹 白钢 聂万达 刘新元 周德英 (74)专利代理机构 天津佳盟知识产权代理有限 公司 12002 代理人 侯力 (51)Int.Cl. A61K 36/605 (2006.01) A61P 3/10 (2006.01) 权利要求书 1 页 说明书 4 页 附图 1 页 权利要求书1 页 说明书4 页 附图1 页 (54)发明名称 桑枝皮中具有抑制α- 糖苷酶活性的水溶性 生物碱纯化方法及应用 (57)摘要 一种从桑枝皮中提取纯化具有抑制α- 糖 苷酶活性的水溶性总生物碱的方法及应用。该 纯化方法以桑枝皮为原料，加入提取溶剂（水：醇 =100%-20% ：0%-80%）提取，加热回流，过滤，重复 提取2 次，合并2 次的滤液，浓缩；加入体积百分 含量为75% ～100% 的甲醇或乙醇，在4 ～30℃进 行醇沉淀；离心或过滤，除去残渣和不溶物，取醇 沉淀浓缩后的上清液，经阳离子交换树脂柱进行 纯化，用去离子水洗去不吸附的杂质，再用0.2 ～ 2mol 氨水洗脱，洗脱液经阴离子交换树脂，用去 离子水冲洗，收集不吸附部分，调pH8 ；采用膜过 滤，滤液干燥，制成干粉，得淡黄色的水溶性总生 物碱提取物，该提取物具有对α—糖苷酶的抑制 A 活性，并且DNJ—含量为50-70%。 5 4 2 0 0 6 2 0 1 N C CN 102600245 A 权 利 要 求 书 1/1 页 1. 一种从桑枝皮中提取、分离、纯化获得具有抑制α- 糖苷酶活性的水溶性总生物碱 的制备方法，其特征是包括如下步骤： 第1、以桑枝皮为原料，以水∶醇＝100％-20％∶0％-80％为提取溶剂，提取溶剂的体 积为桑枝皮重量的6-10 倍；调节提取液PH2-7，加热回流，提取液过滤，重复2 次提取，除去 药渣； 第2、加热减压浓缩第1 步获得的提取液，至原桑枝皮重量的1/2 ～1 倍； 第3、加入体积百分含量为75％～100％的甲醇或乙醇，加入的量为第2 步得到的浓缩 提取液体积的3 ～5 倍，在4 ～30℃进行醇沉淀；离心或过滤，除去残渣和不溶物，得到上 清液； 第4、取第3 步获得的醇沉淀浓缩后的上清液，经阳离子交换树脂柱进行纯化，用去离 子水洗去不吸附的杂质，再用0.2 ～1.5mol氨水洗脱，洗脱液上阴离子交换树脂，收集不吸 附部分，收集液调pH8 ； 第5、采用膜过滤，滤液冷冻干燥成干粉，或将收集液直接喷雾干燥成型制成干粉，得淡 黄色的水溶性总生物碱提取物，该提取物具有对α- 糖苷酶的抑制活性。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述淡黄色的水溶性总生物碱提取物中1-脱 氧野尻霉素含量占总提取物的50％-70％。 3. 权利要求1 所述方法获得的桑皮水溶性总生物碱的应用，其特征是将所述的桑皮水 溶性总生物碱与药物制剂所允许的药物辅料结合，用于制备降血糖药物，制备成适合于使 用的各种剂型。