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ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-05
ALT测定
版序:ABCD
页码:第1 页,共4 页
1 测定方法
酶动力学法。
2 测定原理
L-丙氨酸 + α-酸戊二酸 谷丙转氨酶 丙酮酸 + L-谷氨酸
丙酮酸 + NADH + H+ 乳酸脱氢酶 乳酸 + NAD+
上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性成正比,因此可通过监测吸光度的下降速率,计算出ALT的活性单位。
3 标本
血清、肝素或EDTA抗凝血浆,处理方法见标本处理程序。
稳定性:20-25℃ 稳定1天
4-8℃
-20℃
4 试剂
4.1试剂
来源:ROCHE配套 试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃
R1:打开后机上稳定28天
R2:打开后机上稳定90天
准备:R1:将试剂R1与1a互溶后使用,请按图事示操作:
R2:直接使用。
4.2 校准物
来源:ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下:
S1:0.9%NaCl
S2:C.f.a.s
贮存条件:未溶解:2-8°C
溶解后:15–25°C 8 小时
2–8°C 2 天
(-15)–(-25)°C 2 周 (只能复溶一次)。
准备:每瓶用3ml去离子水溶解。
定标频率:A 试剂盒在仪器上放置28天后
B试剂批号更换后
C 由质控结果决定
ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-05
ALT测定
版序:ABCD
页码:第2 页,共4 页
4.3 质控物
来源: Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
贮存条件:未溶解:2-8°C
溶解后: 25°C
4°C
-20°C
准备:用玻璃吸管准确取5.0ml去离子水,溶解罗氏质控血清,时间30分钟。
质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。
5 仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6 上机操作
见仪器作业指导书。
7 参考范围
男性:0-41U/L;女性:0-31U/L。
8 性能指标
本法线性范围为4-600U/L,不准确度允许范围±20%,不精密度CV=4.4%。本法灵敏度4U/L。
9 注意事项
9.1 血清中含有酮酸能消耗NADH,使结果偏高;血清中谷氨酸脱氢酶增高时,在有氨存在的条件下,亦消耗NADH,使结果偏高。
9.2 血清不宜反复冷冻保存,以免影响酶的活性。
9.3血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.4换算公式:U/l × 0.0167 = ukat/l
9.5仅应用于体外诊断。
9.6扔弃废物应符合当地的法规。
10抗干扰能力:
10.1 标准:回收率在90%-110%之间。
10.2 黄疸:黄胆指数达到60时不会有明显干扰。(直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl)
10.3 脂血:乳糜指数达到500明显干扰。(甘油三酯浓度约为1000mg/dl)。
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生化实验室
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ABCD-SOP-04-05
ALT测定
版序:ABCD
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11 临床意义
丙氨酸氨基转移酶(ALT)属于转移酶类,它能够催化氨基与酮酸之间氨基的转移。在人体的很多组织中均能发现丙氨酸氨基转移酶。其中,其在肝脏中的活性最大,其次是肾、心肌、骨骼肌以及胰腺、脾、肺等组织中。
转氨酶的水平升高可提示有心肌、肝脏等器官损伤。常见于以下情况:
a)肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、胆管炎和胆囊炎等。
b)心血管疾病:心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时的肝脏瘀血、脑出血等。
c)骨骼肌疾病、多发性肌炎、肌营养不良等。
d)一些药物和毒物可引起ALT活性升高:如氯丙嗪、异菸肼、奎宁、水杨酸制剂及酒精、铅、汞、四氯化碳或有机磷等。
e)正常新生儿ALT水平比成人均高2倍,出生后约3个月降至成人水平。
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文件编号:
ABCD-SOP-04-05
ALT测定
版序:ABCD
页码:第4 页,共4 页
ALT参数设置表
TEST NAME [ ALT ]
R.VOLUME(R4) [ 0 ]
TEST CORD [ 685 ]
ABSORBANCE LIMIT [ 7000/DECREASE ]
ASSAY [
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