营养物质进入细胞的方式解析.ppt

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* * * * * * * * * * * * * 2. 理化条件适宜 (1)渗透压; (2)pH值; (3)氧化还原电位; * 渗透压大小由溶液中所含的分子或离子的质点数决定。 等重的物质,如果其分子或离子越小,则质点数越多,因而产生的渗透压越大。 等渗溶液:适宜微生物生长; 高渗溶液:细胞发生质壁分离; 低渗溶液:细胞吸水膨胀 (1)渗透压(osmotic presure)和水活度 * (2)pH 培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型 微生物的生长繁殖或产生代谢产物。 通常培养条件: 细 菌:pH7.0~8.0; 放线菌: pH7.5~8.5; 酵母菌:pH3.8~6.0; 霉 菌: pH4.0~5.8; 为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,或在进行工业发酵时补加酸、碱。 内源调节 缓冲液:K2HPO4/KH2PO4(pH 6.4~7.2) 调节方式 固体碳酸盐:CaCO3 外源调节:流加酸或碱 调节pH值的方法还有流加碳源(降低pH)或氮源(升高pH),也可以通过控制通气量。 * * (3)氧化还原电位 氧化还原电位又称氧化还原电势(redox potential),是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标,其单位是V(伏)或mV(毫伏)。 不同类型微生物生长对氧化还原电位(Ф)的要求不同 好氧性微生物:+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3~+0.4伏为宜; 厌氧性微生物:低于+0.1伏条件下生长; 兼性厌氧微生物:+0.1伏以上时进行好氧呼吸,+0.1伏以下时进行发酵。 * 氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响 增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入 氧化剂,从而增加Ф值; 培养基中加入抗坏血酸(0.1%)、硫化氢(0.025%)、半胱氨酸(<0.05%)、谷胱甘肽、二硫苏糖醇、庖肉等还原性物质可降低Ф值。 培养基中加入氧化还原指示剂刃天青可对氧化还原电位进行间接测定 刃天青在无氧条件下呈无色;在有氧条件下,其颜色与溶液的pH有关,一般在中性时呈紫色,酸性时为红色;在微含氧溶液中,呈粉红色。 * 3. 目的明确 实验室的常用培养基: 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基(或普通肉汤培养基); 放线菌:高氏1号合成培养基; 酵母菌:麦芽汁培养基; 霉菌: 查氏合成培养基; 实验室一般培养:普通常用培养基; 遗传研究:成分清楚的合成培养基; 生理、代谢研究:选用相应的培养基配方。 例如枯草芽孢杆菌: 一般培养:肉汤培养基或LB培养基; 自然转化:基础培养基; 观察芽孢:生孢子培养基; 产蛋白酶:以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基 * * 4、经济节约 配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份, 特别是在发酵工业中,以降低生产成本。 以粗代精 以“野”代“家” 以废代好 粗原料营养更完全,效果更好,价格便宜。 以野生植物原料代替栽培植物原料,如木薯、橡子、薯芋等都是富含淀粉质的野生植物,可以部分取代粮食。 糖蜜、乳清、豆制品工业废液及造纸黑废液等都可作为培养基的原料。 * 以纤代糖 以无机氮代蛋白 开发利用纤维素这种世界上含量最丰富的可再生资源。将大量的纤维素农副产品转变为优质饲料、工业发酵原料、燃料及人类的食品及饮料。 以大气氮、铵盐、硝酸盐或尿素等一类非蛋白质或非氨基酸廉价原料用作发酵培养基的原料,让微生物转化成菌体蛋白质或含氮的发酵产物供人们利用。 以简代繁 某药厂改进链霉素发酵培养基,设法减去30-50%的黄豆饼粉、25%的葡萄糖和20%硫酸铵,结果反而提高了产量。 * 三、培养基确定的四种方法 1.进行生态模拟,研究某种微生物的培养条件; 2.文献查阅,设计特定微生物的培养基配方; 3.精心设计(正交设计等优选法) 4.试验比较,确定特定微生物的最佳培养条件 * 微生物与发酵工业的关系 1.菌种筛选 根据抗性、碳源、氮源筛选不同的工业微生物菌种 例如从自然界筛选产淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、糖化酶的筛选方法。 2.培养基的选择及发酵条件优化 * 思考题: 在某一自然土壤样品中,已知其中存在有极少量的大肠

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