微生物的生长繁殖与生存因子的关系.pptVIP

（五） 综合法 利用低温、干燥和隔绝空气的综合作用，使微生物的代谢处于相对静止的状态，使菌种保存较长的时间。此法是目前最好的菌种保藏法。 先用保护剂制成细胞悬液(含细胞数目108～1010个/mL为宜)分装于安培管内，将悬液冻结成冰(-25℃至-40℃)。大量制备时于-35℃预冻l h，若只制备几管，用干冰、液氮预冻l～5min即可抽气进行真空(真空度在13.3～26.7Pa)干燥，待样品水分升华95％以上时，呈现酥丸状或松散的片状即可。若样品残留水分l～3g/（100g样品）时安培管可封口。置室温或低温保藏均可。 由于加速期和减速期都历时很短，可把加速期并入停滞期，把减速期并入静止期。 * 由于加速期和减速期都历时很短，可把加速期并入停滞期，把减速期并入静止期。 * * * 恒浊连续培养特点：基质过量，微生物始终以最高速率进行生长，并可在允许范围内控制不同的菌体密度；但工艺复杂，烦琐。 使用范围：用于生产大量菌体、生产与菌体生长相平行的某些代谢产物，如乳酸、乙醇等。 * * * ?1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法， 这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法 [1]。目前，我国仍普遍将MPN法用于大肠菌群，大肠杆菌等的检测。因此了解MPN法的原理及局限性，对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用 。  MPN法 (最大可能数法) 1. MPN法的原理 因为细菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可按概率理论计算菌数。如果每份接种样的细菌数平均值为Vl，每个接种管中进入k (k＝0、1、2……)个菌的概率Pn接近于泊松分布。 1915年，McCrady首次发表了用MPN法 (最大可能数法) 来估算细菌浓度的方法， 这是一种应用概率理论来估算细菌浓度的方法 [1]。目前，我国仍普遍将MPN法用于大肠菌群，大肠杆菌等的检测。因此了解MPN法的原理及局限性，对实验室的微生物检测及食品工业的微生物控制都有着重要的指导作用 。  * * 脱氮工艺有：A/O（缺氧－好氧）系统、A2/O（厌氧－缺氧－好氧）或（缺氧－好氧－缺氧）系统、A2/O2（缺氧－好氧－缺氧－好氧）系统、SBR（序批式间歇曝气器）等。 以上工艺达到去除有机物、除氮、除磷的目的。根据不同的水质可选择采用上述其中一种工艺。具体工艺参阅专业书籍。  （三）厌氧微生物与氧的关系 厌氧微生物：在无氧条件下才能生存的微生物叫厌氧微生物。它们进行发酵或无氧呼吸。分为两种：专性厌氧菌和非专性厌氧菌。 1、专性厌氧微生物：如产甲烷菌，要在绝对无氧条件下才能生存，一遇氧就死亡。 　 NADH2+O2→H2O2+NAD 　 专性厌氧微生物无过氧化氢酶，它将被生成的过氧化氢杀死。 O2还可产生游离O2-.（氧自由基），由于专性厌氧微生物不具破坏O2-. 的超氧化物歧化酶（SOD）而被O2-. 杀死。 2、非专性厌氧微生物：氧的存在与否对它们均无影响，存在氧时它们进行产能代谢，不利用氧，也不中毒。例如，大多数的乳酸菌，不论在有氧或无氧条件下均进行典型的乳酸发酵。 耐氧的厌氧微生物虽具有超氧化物歧化酶，能耐氧，然而它们缺乏过氧化氢酶，仍会被过氧化氢杀死。 污水和污泥的厌氧消化反应中，厌氧微生物起作重要作用。 厌氧微生物进行发酵或无氧呼吸。 厌氧微生物的栖息处： * 为湖泊、河流和海洋沉积处； * 泥炭、沼泽、积水的土壤； * 灭菌不彻底的罐头食品中； * 油矿凹处； * 污水、污泥厌氧处理系统中。 厌氧微生物的生境： 培养厌氧微生物的方法 在无氧条件下培养厌氧微生物。在接种和移种传代时，用氦气、氢气或氮气驱赶氧气，氮气用得比较多。通入氮气驱赶培养基的氧以后，用不透氧的橡皮塞塞紧以防止气进入，在培养基中加氧化还原性颜料[甲基蓝或刃天青(resazurin)]指示培养基内的氧化还原电位。甲基蓝和刃天青在还原态时为无色，在氧化态时显色。当培养基变色表明培养管内有氧。 确保厌氧微生物生长的措施： ① 将培养管、培养瓶、平板放在无氧培养罐内培养。 ② 将专性厌氧菌和兼性厌氧菌混合培养，营造厌氧环境，一旦渗入氧，可被兼性厌氧菌用掉，以达到厌氧环境，从而获得专性厌氧菌。  综合上述微生物与氧的关系可见： 在一个污（废）水或固体废弃物生物处理系统的微生态系中，不论是用好氧方法处理还是用厌氧方法处理，有好氧微生物、兼性厌氧微生