dna重组技术的基本工具改版.pptxVIP

第1节1DNA重组技术的基本工具问题探讨培育抗虫棉需要哪些基本工具?手术刀缝合针运输工具自主学习“限制性核酸内切酶——分子手术刀”分布种类特点结果主要从原核生物中分离纯化而来已经分离出大约4000种1、识别某种特定核苷酸序列2、使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。形成黏性末端或平末端磷酸二酯键EcoRI限制酶的切割　黏性末端黏性末端SmaI限制酶的切割平末端　　　平末端自主学习“分子缝合针”——DNA连接酶功能类型来源相同差别恢复磷酸二酯键E·coliDNA连接酶大肠杆菌只能连接黏性末端T4DNA连接酶T4噬菌体能连接黏性末端和平末端(效率较低)可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来DNA连接酶的缝合作用DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？DNA连接酶的缝合作用DNA聚合酶的作用A A T T GCATATAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶两个DNA片段之间形成磷酸二酯键DNA连接酶: 将一个个核苷酸连接起来，形成磷酸二酯键DNA聚合酶:1）作为运载工具，将目的基因导入受体细胞中2）在受体细胞内对目的基因进行大量复制载体的作用1)能自我复制2)具多个限制酶切点3)具有某些标记基因4)必须是安全的 ,对受体细胞无害.载体的必要条件①细菌的质粒 ②病毒：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。 载体的种类自主学习最常用运载体——质粒分布：许多细菌、 酵母菌等生物有切割位点本质:小型环状DNA分子有标记基因能复制并带着插入的目的基因一起复制练习1、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNAD2．基因工程中可用作载体的是①质粒 ②噬菌体 ③病毒 ④动物细胞核A．①②③B．①②④C．②③④D．①③④A3、下列说法正确的是：（ ） A、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、 连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”D4．下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是 B A．①② B．①③ C．①④ D．②③小试身手限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。（1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。（2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。（3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） 谢谢观看更多精彩尽在/wbdjjx/wbdjjx