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空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准
1、?目的:
检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设
备的微生物指标,生产区域环境当中病原微生物的监控,达到规定标准,
以控制食品成品的质量。
2、?参照标准:
中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》
GB15979-1995、《HACCP?原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共
场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T 18204.1-2000、中华人
民共和国进出口商品检验行业标准?SN?0169-92/SN?0172-92/?SN?0170-
92、 出入境检验检疫局二?000?四年《出入食品微生物检验培训教材》中
《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法。
3、?采样与检测方法:
3.1?空气的采样与测试方法
3.1.1?样品采集:
(1)取样频率:
a)车间转换不同卫生要求的产品时,在加工前进行采样,以便了解车间卫
生清扫消毒情况。
b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行采样。
c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间进行采样,如有检验不合格
点,整改后再进行采样检验。
d)实验性新产品,按客户规定频率采样检验。
e)正常生产状态的采样,每周一次。
(2)采样方法
在动态下进行,室内面积不超过?30?m2,在对角线上设里、中、外三
点,里、外点位置距墙?1?m;室内面积超过?30?m2,设东、西、南、北、
中五点,周围?4?点距墙?1 m。采样时,将含平板计数琼脂培养基的平板
(直径?9 cm)置采样点(约桌面高度),并避开空调、门窗等空气流通处,
打开平皿盖,使平板在空气中暴露?5 min。采样后必须尽快对样品进行
相应指标的检测,送检时间不得超过?6h,若样品保存于?0~4℃条件时,
送检时间不得超过?24h。
3.1.2?菌落培养:
(1)在采样前将准备好的平板计数琼脂培养基平板置?37℃±1℃?培养?24
h,取出检查有无污染,将污染培养基剔除。
(2)将已采集样品的培养基在?6?h?内送实验室,细菌总数于?37℃±1℃培
养?48h?观察结果,计数平板上细菌菌落数。
(3)菌落计算:
a) 记录平均菌落数,用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数,标记
或在菌落计数器上点计,然后用?5~10?倍放大镜检查,不可遗漏。
b)?若培养皿上有?2?个或?2?个以上的菌落重叠,可分辨时仍以?2?个或?2
个以上菌落计数。
3.2?工作台(机械器具)表面与工人手表面采样与测试方法:
3.2.1?样品采集:
(1)取样频率:
a)车间转换不同卫生要求的产品时,在加工前进行擦拭检验,以便了解车
间卫生清扫消毒情况。
b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行全面擦拭检验。
c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间可疑处进行擦拭,如有检验
不合格点,整改后再进行擦拭检验。
d)实验新产品,按客户规定擦拭频率擦拭检验。
e)对工作表面消毒产生怀疑时,进行擦拭检验。
f)正常生产状态的擦拭,每周一次。
(2)?采样方法:
a) 工作台(机械器具):用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面
(取与食品直接接触或有一定影响的表面)取?25cm2 的面积,在其内
涂抹?10?次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含?10mL?灭菌生理
盐水的采样管内送检。
b) 工人手:被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从
指尖到指端来回涂擦?10?次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入
含?10mL?灭菌生理盐水的采样管内送检。
(3)采样注意事项:
擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细
记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间
3.2.2?细菌·大肠菌群的检测培养:
样液稀释:将放有棉棒的试管充分振摇。此液为?1:10?稀释液。如
污染严重,可十倍递增稀释,吸取?1ml?1:10?样液加?9ml?无菌生理盐水
中,混匀,此液为?1:100?稀释液。
3.2.2.1?细菌总数:
(1)以无菌操作,选择?1~2?个稀释度各取?1ml?样液分别注入到无菌平皿
内,每个稀释度做两个平皿(平行样),将已融化冷至?45℃左右的平
板计数琼脂培养基倾入平皿,每皿约?15ml,充分混合。
(2)待琼脂凝固后,将平皿翻转,置?36℃±1℃?培养?48?h?后计数。
(3)结果报告:报告每?25cm2?食品接触面中或每只手的菌落数
3.2.2.2?大肠菌群:
(1)平板法:
a) 以无菌操作,选择?1~2?个稀释度各取?1ml?样液分别注入到无菌平皿
内,每个稀释度做两个平皿(平行样),将已融化冷至?45℃左右的去
氧胆酸盐琼脂培养基倾入平皿,每皿约?15ml,充分混合。待琼脂凝固
后,再覆盖一层培养基,约?3-5
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