高等教育基因突变和表观遗传变异.pptxVIP

9.1 基因突变的类型;突变的多方向性 与复等位基因;中性突变（neutral mutation）多肽链中相应位 点发生的氨基酸的取代并不影响蛋白质的功能; 沉默突变（silent mutation）蛋白质中相应位点 发生了相同氨基酸的取代，即同义突变。;移码突变（frameshift mutation） 回复突变（reverse mutation）， 一类是正向突变（forward mutation）突变方向是从野生型向突变型；另一种是回复突变，其突变方向是从突变型向野生型 抑制突变（suppressor mutation）突变的作用还可以通过其它位点的突变（A B）而得到补偿或校正。 ; 9.2 基因突变的分子基础;;DNA结构与复制;3’ → 5’ 核酸外切酶活性——校对功能;碱基的互变异构可造成复制差错 ;碱基的互变异构可造成复制差错; DNA复制中碱基互变异构引起的突变; DNA复制中碱基互变异构引起的突变;DNA复制中碱基环出/跳格造成移码突变;DNA复制中碱基环出/跳格造成缺失与重复;9.2.1.2 自发的化学变化 1.脱嘌呤作用 ;2.脱氨基作用:C →U;;脱氨基作用: 5mC →T[突变热点];3.氧化作用损伤碱基;9.2.1.3 转座子和插入序列引起的基因突变;9.2.1.4 不等交换产生重复和缺失突变;9.2.2 诱发突变的分子基础; 2.碱基的修饰剂 (1) 亚硝酸（introus acid, NA） (2) 羟胺 (3) 烷化剂，它们的作用是使碱基烷基化 3.DNA插入剂 原黄素（proflavin） 吖啶橙（acridine orange） 溴化3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓 （etnidium bramide） ICR的复合物等;9.2.2.1 放射线诱发的突变;; ;碱基类似物（5-BU）的掺入——转换;碱基类似物（2-AP）的掺入——转换;碱基类似物（2-AP）的掺入——转换;(2) 2-氨基嘌呤(2-AP)也是碱基的类似物，有正常状态和稀有状态两种异构体，可分别与T和C配对结合。当2-AP掺入到 DNA复制中时，由于其异构体的变换而导致A∶T G ∶ C;2. 碱基的修饰剂 (1) 亚硝酸（introus acid, NA）有氧化脱氨作用，可使G第2个碳原子上的氨脱去，产生黄嘌呤（xanthine,x），次黄嘌呤 (H) 仍和C配对，故不产生转换突变。但C和A脱氨后分别产生U和次黄嘌呤H，产生了转换，使C∶G转换成A∶T，A∶T转换成G∶C ;;碱基修饰剂的诱变作用;;（2）羟胺只特异地和胞嘧啶起反应，在第4个C原子上加-OH，产生4-OH-C，此产 物可以和A 配对，使C∶G转换成T∶A ;(3)烷化剂如甲基黄酸乙脂（EMS）,氮芥(NM),甲基黄酸甲脂（MMS）,亚硝基胍（NG）等，它们的作用是使碱基烷基化，EMS使G的第6位烷化，使T的第4位上烷化，结果产生的O-6-E-G和 O-4-E-T分别和T、G配对，导致G∶C对转换成A∶T对；T∶A对转换成C∶G ;;3.DNA插入剂导致碱基增减;嵌合剂的插入——移码突变;9.3 体外定点诱变;寡核苷酸介导的单链模板定点突变;基于PCR 的体外定点突变;基于PCR 的体外定点突变;9.4 突变剂的检测;突变和人类疾病;;; (二) 诱发突变和人类的肿瘤;9.5 基因突变的生物学防护与修复 ; 9.5.2 DNA的修复机制;UV损伤的光修复/光复活;(一) 一般切除修复 切除修复(excision-repair) 暗修复（dark repair） 切-补（-切）-封 短-补丁修复（short-patch repair）（~20nt)组成型 长-补丁修复（long-patch repair） （1500nt)诱导型 着色性干皮病（Xeroderma pigmentosum）是一种切除修复酶的缺陷;;E.Coli 中的切除修复系统;;Uvr系统在修复各阶段中的作用：UvrAB识别损伤， UvrBC在DNA上切一缺口， UvrD使被标记区解旋;着色性干皮病（Xeroderma pigmentosum）是一种切除修复酶的缺陷 ; (二) 特殊切除修复途径;重组修复（recombination-repair）;在E.coli中的提取(retrival)系统;9.6 基因突变的检出 ;9.6.1 传统遗传学检出法;2、果蝇突变的检出;（1）果蝇伴性隐性致死/非致死突变的检出 利用 Muller-5品系检出X隐性突变;（2）常染色体基因突变的检出