临床检验仪器学-—离心机、显微镜、生物安全柜.ppt

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分辨率(resolution):显微镜的最重要参数,指显微镜分辨两个物点之间的最小间距。 D= 0.61λ NA D:分 辨 率 λ :光波的波长 NA:数值孔径 分辨率D的值越小分辨率越高 NA值越大,分辨率越高 波长越短分辨率越高 (二) 分 辨 率 提高显微镜分辨率的方法 (1)增大物镜的数值孔径 在物镜和盖玻片之间充以折射率(n)较大的油,如香柏油。 (2)用短波长的光照射 在具备最大的数值孔径值,并使用波长最短的可见光的高质量显微镜时,光学显微镜的分辨率接近0.2um。 (三) 放 大 率 放大率(magnification) ,样本经过物镜和目镜的两次放大,所以显微镜总的放大率是物镜放大倍率和目镜放大率的乘积。显微镜的有效放大率(M)的公式: M=肉眼分辨率÷显微镜分辨率 肉眼分辨率,是明视距离(25cm)处可分辨的两点距离,约0.2mm;分辨率接近0.2um的光学显微镜,其有效放大率(M)=1000倍 (四) 视 野 视野(field of view)又称视场(field),是显微镜观察时所看到样本的圆形范围,其大小是由视场光栅决定的。 (五) 景 深 景深(depth of field)又称焦点深度,即使用显微镜聚集某一观察平面时,不仅位于平面上的各点可以看清楚,而且此平面的上下一定厚度内的各点也能看得清楚,这个厚度称为景深,与放大倍数和分辨率成反比。 (六) 工 作 距 离 工作距离(work distance) 是指从物镜前透镜表面中心到被观察标本间满足工作要求的距离范围,与物镜的数值孔径成反比。 平时习惯说的调焦,实际上是调节物镜的工作距离,把被观察标本调在物镜的一倍至二倍焦距之间。 * 人眼分辨率:是指明视距离25cm处,可分辨的最小两点距离,约0.2mm 光学显微镜分辨率:约0.2um 电子显微镜:0.2nm 细菌的直径一般为0.5~1um 多数病毒直径在20~200nm, 较大的病毒直径为300-450nm, 较小的病毒直径仅为18-22nm 第 二节 电 子 显 微 镜 电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。 电子显微镜分辨率为0.2nm。 二、电子显微镜的分类及其应用 电子显微镜的分类: (一)透射电镜(Transmission electron Microscope,TEM) (二)扫描电镜(Scanning electron Microscope,SEM ) (三)扫描隧道显微镜(scanning tunneling microscope, STM) (一)透 射 电 子 显 微 镜 (Transmission electron Microscope,TEM) 透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。 (二) 扫描电子显微镜 (Scanning electron Microscope,SEM ) 扫描电镜的分辨率为3-10nm 立体感强 第三节 特殊光学显微镜 一、荧光显微镜 二、相衬显微镜 三、倒置显微镜 四、暗视野显微镜 五、偏光显微镜 六、激光扫描共聚焦显微镜 七、紫外光显微镜 八、干涉相衬显微镜 九、近场扫描光学显微镜 思考题 离心机: 什么是离心现象及离心技术? 什么是离心力及相对离心力? 什么是密度梯度离心法? 按转数分类,包括有哪些离心机? 显微镜: 光学显微镜的工作原理? 光学显微镜的性能参数主要有哪些? 什么是分辨率?光学显微镜的分辨率(最小分辨距离)是多少? 第二十一章 生物安全柜 思考题 1.气溶胶和生物气溶胶是指什么? 2.生物安全柜的工作原理是什么? 3.根据气流及隔离屏障设计结构,将Ⅱ级生物安全柜分为哪几个类型? 4.Ⅱ级B2型生物安全柜的性能特点有哪些? 生物安全柜 前 言 气溶胶 是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001μm~100μm的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系。含有微生物或生物大分气子的气溶胶叫生物气溶胶。 含有病原微生物的气溶胶会对操作人员和环境造成危害,也会导致样品之间的交叉污染,使用生物安全柜可以避免这些危害和污染。 标本 ? 第一节 生物安全柜的工作原理和分类 一、生物安全柜的基本工作原理 1.将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压状态、安全柜内的气体不能外泄从而保护工作人员; 2.外界空气经

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