临床免疫学—绪论.ppt

—*— 本学期主要授课教师： 徐霞教授(教研室主任） 杜晶春副教授 谢闺娥讲师（教学秘书） 临床老师 （附属医院检验科） 授课形式： 理论课—课堂讲授与讨论 实验课—综合性实验及验证实验 ? 考核方式及具 体安排 期末考核 形式 形式 占课程成绩% ?闭卷 ?笔试 ?60% 平时考核 形式 % 形式 % 占课程成绩% 小测验 ?10 ?操作考试 ?10 ?40% 实验报告 ?10 ?讨论课 ?10 形成性评价 讨论课：综合性实验方案设计 文献阅读汇报 讨论课前2~3周布置题目，分组，每个组根据分配到的题目进行实验方案设计或文献阅读，制作ppt，讨论课上派代表进行汇报，教师点评并讨论。  临床免疫学检验(Clinical laboratory immunology)是研究和应用免疫学理论和技术对临床疾病进行诊断的一门检验医学学科。 你知道吗？ 临床免疫学检验的发展简史 临床免疫学检验的诞生 标记免疫技术的建立与发展 现代临床免疫学检验 临床免疫学检验的诞生(100多年的历史) 1896年Widal利用伤寒患者血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象,诊断伤寒----肥大反应 1898年Bordet在研究补体溶血机制的基础上建立了补体结合试验，随之被用于诊断梅毒 1900年Landsteiner发现人ABO血型，此后血型鉴定成为临床检验中的重要项目 1945年Coombs建立抗球蛋白试验用于溶血性贫血时红细胞不完全抗体的检测 1946年Oudin报道了试管免疫扩散技术，进一步发展为凝胶中的沉淀反应技术 —*— 颗粒性抗原（细菌或细胞）与相应抗体直接结合所出现的凝集现象(agglutination test) ： 玻片法—定性试验：已知 Ab ? 未知 Ag(?) —*— 试管法凝集反应—半定量试验： 诊断伤寒副伤寒的“肥达反应” 伤寒细菌悬液 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 对照 病人血清倍比稀释 —*— Ag Ab C Ag C RBC 溶血素 RBC 溶血素 C 不溶血 溶血 补体结合反应(complement-fixation reaction) 是在补体参与下，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统，来检测未知抗原或抗体的血清学试验。 指示系统: 绵羊红细胞 +溶血素 +补体 待检系统： 已知Ag+未知Ab 或已知Ab+未知Ag。 —*— Ag Ab 扩散 Ag Ab 扩散 1:2 1:4 1:8 1:16 1:24 1:64 双向琼脂扩散 ( double immunodiffusion)： ----定性检测Ag或Ab ； Ab效价滴定 —*— 标记免疫技术是以标记物示踪抗原与抗体结合反应的检测技术。是当今免疫检验的主流技术 荧光抗体技术（fluorescent antibody technique) 放射免疫技术 (radioimmunoassay technique) 酶免疫技术 (enzyme immunoassay) 发光免疫技术 (luminescence immunoassay techniques) 胶体金免疫技术(colloidal gold immunoassay) 标记免疫技术的建立与发展（20世纪中叶开始） —*— 荧光抗体技术 利用荧光素标记抗体或抗抗体以检测细胞表面或细胞内抗原的技术。是将抗原抗体反应的特异性与荧光物质检测的敏感性和显微形态学的直观性相结合的一种免疫分析技术。 直接法 间接法 直接法:每检测一种抗原必须制备相应的荧光抗体 间接法:敏感性比直接法高,制备一种荧光二抗可用于多种抗原的检测 —*— 放射免疫测定法(RIA)示意图 Ag* Ab Ag 标记抗原 特异性抗体 待测抗原 ( Ag*-Ab)+ (Ag-Ab) 抗原抗体复合物 分离Ag*-Ab 和游离Ag* 从标准曲线上读知含量 测定Ag*-Ab和/或游离Ag*放射性 —*— 用酶标记Ab(或Ag)与标本中的Ag(或Ab)发生特异性结合 加入酶的底物，在酶作用下产生有色物质, 根据颜色可作出判断或测量光密度值 + + + 双抗体夹心法(检测抗原) 酶免疫技术：酶联免疫吸附试验(ELISA) —*— 斑点免疫金层析试验 G T C —*— 临床免疫学检验技术 一、临床免疫学检验技