临床免疫学—双扩试验.ppt

双向免疫扩散试验 临床免疫学检验教研室 实验室规则 1.进入实验室要穿白大衣。书及文具等放指定区域。实验材料严禁带出实验室外。 2.实验室内禁止饮食。 3.实验完毕要清理桌面。 4.安排值日搞卫生。 5.实验报告要及时交。 临床免疫学检验实验报告 1.实验名称 2.实验原理 3.主要材料（简略） 4.实验步骤 5.结果及分析 6.讨论及问答题 请在实验报告封面写上： 姓名 班别 学号 组别 实验目的 掌握双向免疫扩散试验的原理、操作方法。 实验原理 本质上属于固相免疫沉淀反应； 可溶性抗原和抗体分别在含有电解质的固相介质中向四周扩散, 若抗体抗原相对应, 则在比例适宜处形成沉淀线； 若将待检抗体做系列倍比稀释，可以根据白色沉淀线逐渐消失的情况确定抗体的效价。 试剂与材料 1. 已知浓度的抗原：人IgG 2. 待测抗血清 3. 1.5%琼脂糖: 生理盐水配制 4. 生理盐水 5. 载玻片、移液管、打孔器、针头、移液器、湿盒 实验步骤 1. 标记 2. 制板 （4~5ml琼脂糖溶液/玻璃板; 静置待凝） 3. 打孔 （梅花形，间距保持4~5mm） 4. 固定 （过火5~6次） 5. 准备抗血清 （1/2；1/4；1/8；1/16） 6. 加样（10μl/孔） 7.温育 结果判断： 出现沉淀线的最高抗体稀释度即为该抗体在对应抗原浓度下的效价。 注意事项: 自己总结 思考题: 1. 如何根据双扩实验中沉淀线的状态对抗原和抗体的性质进行分析？ 梅花形 加样 * * * * * * * * * * * * * *