国家标准GB_婴幼儿配方食品和乳粉维生素K1的测定.pdfVIP

GB/T5413.11一1997 台 前 ．二1 本标准给出两种方法，方法一是荧光法，重现性好，准确度较高。方法二是高压液相色谱法，测定速 度快。 本标准方法一为仲裁法 本系列标准从实施之日起，代替GB5413-850 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳品标准化中心归口。 本标准负责起草一单位：国家乳制品质量监督检验中心、浙江省轻工业研究所。 本标准参加起草单位：卫生部食品卫生监督检验所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢 （中国）投资服 务有限公司。 本标准主要起草人：李茂胜、任一平、黄百芬、郎昭斌、陈青俊、王芸。 中华人 民共和国国家标准 婴幼儿配方食 品和乳粉 GB/T 5413.11一1997 维生素B。的测定 代替 i〔B541385 Milkpowderandformulafoodsforinfantandyoungchildren -DeterminationofvitaminB,content 范围 本标准规定了用荧光法和反相高压液相色谱法测定维生素B,的方法。 本标准方法一适用于乳粉中维生素B，的测定；方法二适用于婴幼儿配方食品和乳粉中维生素B，的 测定。 方法一 荧光法 方法原理 样品在稀盐酸溶液中消化，过滤，除去蛋白质等物质。如果样品中维生素B,系游离态，可直接在碱 性铁氰化钾中氧化成OV,色素，在紫外光照射下发出荧光，其荧光强弱与唾嗜色素成正比；如果维生素 B，系结合态，则须经酶解转为游离态，层析除去杂质后再作荧光检测。检测所使用的激发波长Ex为 365nm，发射波长EM为435nmo 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。 3.1盐酸；c(HCI）为0.lmol/La 3.2氢氧化钠：c(NaOH）为1508/Lo 3.3 异丁醇：重蒸馏。 3.4 乙酸钠：c(NaAc）为2mol/L。 3.5 酸性乙醇：体积分数为20Y。用盐酸调节pH为3.5-4.30 3.6 淀粉酶 生（化试剂）溶液：100g/L。 3.7 中性氯化钾：c(KCI）为250g/Lo2508氯化钾溶于1000mL水中。 3.8 酸性氯化钾：c(KCI）为250g/I。加8.5ml盐酸F1L中性氯化钾溶液中。 3.9 铁氰化钾：cLK,Fe((N)6］为IOg/L，使用当天配制。 3.10 氧化齐！Jo 111标准溶液 3门1门 维生素B,标准贮备液，浓度为100Pcg/ml。 准确称取50.Omg在五氧化 几磷一干燥器内至恒童的）分析纯维生素B,盐酸盐，溶解于400ml.左右 体积分数为20％的酸性乙醇溶液(3（.5）中，并定容一f500ml_棕色容堂瓶中，于100C左右贮存。 取4毫升lOg/L的铁氰化钾 3（.9),用1508/L的氢氧化钠溶液 3（.2)稀释至100mL，配好后骨于暗 国家技术监督局1997一05一28批准 1998一09一01实施 cB/i5413.11一1997 处4h内使用。 3门1.2维生素B,标准工作液，浓度为3p.g/ml_o 吸取上述标准贮备液3mL，用0.lmol/L盐酸(3（.1)稀释至100m1_，每次实验须新鲜配制。 3.12 乙酸，体积分数为3％一50o0 将 30mL冰乙酸用水稀释至 1000MLo 3.13 活化人造沸石，40^60F]，化学纯。 沸石的活化：称取 100g人造沸石于大烧杯中，加十倍体积的热乙酸(3（.12)，在搅动下煮沸15min, 待澄清后弃去乙酸溶液，如此重复三次，再加五倍体积的热酸性氯化钾溶液 3（.8)，于搅拌下煮沸 15min，待澄清后弃去氯化钾溶液，重复三次，然后再用热水洗至无氯离子存在，用布氏漏斗抽滤，于 100℃烘箱干燥