《医学微生物》第7章细菌感染的检查方法与防治原则.ppt

第7章 细菌感染的检查方法 与防治原则 第一节 细菌感染的实验室诊断 一、细菌学检测 二、血清学诊断 一、标本采集、送检的原则 1、早期采集 2、无菌操作 3、采集适当的标本 4、采集双份血清 5、尽快送检 6、其他 二、细菌学检测 （一）细菌形态学检查 1、不染色标本检查法 目的：观察病原菌的动力和运动情况 方法：悬滴法、压滴法 仪器：暗视野显微镜、相差显微镜 悬滴法 2、染色标本检查法 （1）单染色：只用一种染料进行染色，分正染和负染，用于观察形态，不能鉴别染色性。 （2）复染色：用两种或两种以上染料进行染色，常用的有革兰染色、抗酸染色、荧光染色，既可观察形态、结构，又可鉴别染色性。 革兰染色法： 　◆　制片：涂片——干燥——固定 　◆　染色： 结晶紫初染1分钟 水冲洗 碘液媒染1分钟 95%乙醇脱色30秒左右 稀释复红复染30秒 干后，油镜下观察结果 水冲洗 水冲洗 水冲洗 革兰染色步骤 革兰染色法结果： G+菌—紫色 G-菌—红色 革兰染色原理： 1、等电点学说 G+菌：PI为2—3 G-菌：PI为4—5 结晶紫为一碱性染料，与G+菌结合更多。 2、化学学说 G+菌含有核糖核酸镁盐，加入碘液可与结晶紫形成牢固复合物。 G-菌不含有核糖核酸酶盐。 3、通透性学说 G-菌细胞壁为二维平面结构，较疏松，有利于95%乙醇渗透脱色。 G+菌细胞壁为三维立体结构，较牢固， 95%乙醇渗透脱色作用较弱。 （二）细菌分离培养与鉴定 1、分离培养：接种于培养基，观察生长现象，涂片、染色、镜检 2、生化反应 3、血清学鉴定 4、动物实验 5、药敏试验 6、自动化鉴定分析 （三）细菌成分检测 1、抗原的检测：免疫标记技术、对流免疫电泳等 2、核酸的检测：核酸杂交、PCR等 三、血清学诊断 抗体的检查（双份血清升高4倍以上） 直接凝集试验 乳胶凝集试验 中和试验 ELISA等 第二节 特异性预防 一、人工主动免疫 （一）疫苗 1、死疫苗（灭活疫苗） 2、活疫苗（减毒活疫苗） 3、亚单位疫苗 4、基因工程疫苗 5、重组载体疫苗 6、核酸疫苗（DNA疫苗） 死疫苗 活疫苗 性状 死 活 接种次数和剂量 多（2-3次）、大 少（1次）、小 途径 皮下 自然感染 效果 弱，维持时间短 强，维持时间长 稳定性 稳定，易保存 不稳定 安全性 安全 毒力“返祖” 机制 体液免疫 体液免疫、细胞免疫、局部免疫 常用疫苗 霍乱、伤寒等 卡介苗、麻疹等 （二）类毒素 外毒素经0.3~0.4%甲醛处理后，失去了毒性但仍保留免疫原性的生物制品。 二、人工被动免疫 1、抗毒素 2、抗菌血清 3、胎盘球蛋白、血清丙种球蛋白 项目 主动免疫 被动免疫 接种物质 抗原 抗体 接种次数 1～3次 1次 生效时间 2～3周 立即 维持时间 数月～数年 2～3周 主要用途 预防 治疗和紧急预防 两种人工免疫方法的比较 第三节 细菌感染的治疗 抗菌药物： 微生物合成抗生素 半合成抗生素 人工合成抗菌药物