核酸的结构与功能PPT课件2.pptx

核酸的结构与功能;核酸研究历史;核酸是以核苷酸(nucleotide)为基本组成单位的生物大分子;1. 元素组成 C、H、O、N、P（9~11%）;嘌呤(purine) ;;戊 糖 Pentose;（构成RNA）;碱基;核苷酸(nucleotide);; 3’, 5’-环腺苷酸（cAMP） 3’, 5’-环鸟苷酸（cGMP） 细胞信号转导中的 “第二信使”;; 单核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接成大分子——多核苷酸。;;DNA的二级结构 secondary structure;Chargaff规则： 腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔数相等 。A=T 鸟嘌呤与胞嘧啶的摩尔数相等。G=C; Franklin的X衍射照片显示DNA是双链并呈螺旋分子。 Wilkins ;2、DNA双螺旋结构要点;A T C G;3、DNA双螺旋结构的多样性;3、DNA的多链结构;二 DNA的超螺旋结构(superhelix 或supercoil);;腺嘌呤(adenine, A);基因（gene）：DNA上的功能单位，能够编码蛋白质或者RNA。; RNA通常是单链形式存在，局部有二级或三级结构。 RNA分子小，种类多，功能亦多。;RNA的种类、分布、功能;（一）信使RNA（mRNA）的结构与功能; 功能：将核内DNA的碱基排列顺序（遗传信息)按碱基互补原则转录为hnRNA mRNA ，穿过核膜进入胞质，指导蛋白质合成中的氨基酸排列顺序。 三联体密码：mRNA分子上每三个核苷酸为一组，决定肽链上的一个氨基酸。;真核生物 成熟mRNA;二、转运RNA的结构与功能;tRNA;“三叶草”形 的二级结构;* tRNA的三级结构 —— 倒L形;* rRNA的结构;* rRNA的种类（根据沉降系数）;Sedimentation coefficent (沉降系数);;小分子干扰核糖核酸（siRNA）;;核酶（ribozyme）是具有催化功能的RNA分子。;1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;;三、 DNA的复性与分子杂交。 复性：变性的DNA在适当的条件下，两条DNA单链可重新配对，恢复天然的双螺旋构象。变性的逆过程 退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性。 ;分子杂交（hybridization） **两条来源不同的核酸单链间，因部分碱基互补配对，在适宜的条件下（温度及离子强度等），可以形成杂交双链。如DNA/DNA、DNA/RNA、RNA/RNA杂交分子。 ;; The result of FISH The digoxigenin-labeled probe was visualized with anti-DIG-rhodamine（red） The biotin-labeled probe, with avidin-FITC（green）;;色彩缤纷的 核酸世界;第二章 核酸复习大纲;Key words;1．核酸中核苷酸之间的连接方式是（ ） A．2’,3’-磷酸二酯键 B．3’,5’-磷酸二酯键 C．2’,5’-磷酸二酯键 D．糖苷键 E．氢键 2．DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确（ ） A．腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B．同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C．DNA双螺旋中碱基对位于外侧 D．二股多核苷酸链通过A与T或C与G之间的氢键连接 E．维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆积力 3．tRNA 的结构特点不包括（ ） A．含甲基化核苷酸 B．5’末端具有特殊的帽子结构 C．三叶草形的二级结构 D．有局部的双链结构 E．含有二氢尿嘧啶环;4．与pCAGCT互补的DNA序列是（ ） A．pAGCTG B．pGTCGA C．pGUCGA D．pAGCUG