11dna重组技术的基本工具课件人教版选修3.pptVIP

专题1 课前预习 ·巧设计 名师课堂 ·一点通 创新演练 ·大冲关 重点突破 课堂强化 知识清单 案例师说 1.1 每课一练 了解 1.基因工程的概念 2.DNA重组技术所需三种基本工具 的来源和作用 理解 基因工程载体需要具备的条件 1.DNA重组技术所需三种基本工具的作用 2.基因工程载体需要具备的条件 一、基因工程的概念 指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过 和 等技术，赋予生物以新的 ，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由 于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做 。 体外 DNA重组 转基因 遗传特性 DNA重组技术 二、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)简称：限制性核酸内切酶又称 。 (2)来源：主要从 中分离纯化出来。 (3)作用： ①识别双链DNA分子的某种 。 ②切割特定部位的两个核苷酸之间的 。 (4)作用结果：产生 或 。 限制酶 原核生物 特定核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 G A 磷酸二酯键 限制酶 T T C A … … … … … … … … 限制酶识别序列 ★ EcoRⅠ限制酶： ★ SmaⅠ限制酶： GGG CCC G CTTAA GGG CCC G AATTC 三、DNA连接酶——“分子缝合针” 1．作用 恢复被 切开的两个核苷酸之间的 ，拼接成新的DNA分子。 2．种类 限制酶 磷酸二酯键 种类 比较 项目　　　 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 特点 只能“缝合”具有 的双链DNA片段 既可以“缝合”双链DNA片段互补的 ，又可以“缝合”双链DNA片段的 大肠杆菌 T4噬菌体 互 补的黏性末端 黏性末端 平末端 ★ EcoRⅠ限制酶：GAATTC C G A A T T A T A G T C DNA连接酶 DNA连接酶 DNA连接酶 A T A G T C C G A A T T C A A T T DNA聚合酶 G A G T A T C DNA聚合酶 四、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1．作用 将 送入受体细胞。 2．种类 (1)质粒：是一种很小的 。 (2)其他载体： 的衍生物、 等。 3．特点 (1)能够进行 。 (2)有一个至多个 切割位点，供外源基因插入。 (3)具有特殊的 ，供重组DNA的鉴定和选择。 (4)对受体细胞无害。 外源基因 双链环状DNA分子 λ噬菌体 动植物病毒 自我复制 限制酶 标记基因 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1．阅读教材P4～5，分析图1－2、1－3，探究下列问题： (1)限制酶切割DNA分子时，其切割部位在哪里？具有怎样的作用特点？ 提示：①切割部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 ②作用特点： a．具有专一性。具体表现在两个方面：识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列；切割特定序列中的特定位点。 b．可用于DNA的切割，获取目的基因和切割载体。 (2)利用限制酶切割得到的是黏性末端或平末端，二者有什么区别？ 提示：①黏性末端：是限制酶在识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开形成的，如下图所示。 ②平末端：是限制酶在识别序列的中心轴线处切开形成的，如下图所示。 具有黏性末端的DNA片段能够通过互补碱基间的配对重新结合，而具有平末端的DNA片段不容易结合。