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实验一 ：使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的 ： 1、学会如何使用显微镜观察细胞 ； 2、了解细胞的结构 ； 3、学会制作临时装片。 二、实验材料 ：（实验材料可换 ）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片 三、实验用具 ：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜 （物镜 5X、10X、40X ） 四、方法步骤 ： 1、制作松针的临时切片 ： （1 ）取干净的载玻片一个平置于试验台上 ，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 （2 ）将土豆切成条状 （截面约 ：0.5X0.5cm)取两条 ，将一根松针夹在两个土豆 条之间 ，用刀片削成尽量 薄的薄片 ，削时 ，手腕不动 ，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较 薄的切片 ，置于载玻片 的水滴上。 （3 ）从一侧轻轻盖上盖玻片 ，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的 水滴 ，即完成临时切片 的制作。 2、观察切片 ： （1 ）取出显微镜 ，置于试验台上靠左的位置 ，打开光源。 （2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上 ，调整载物台位置 ，使盖玻片 对准光源。 （3 ）使用 5X 物镜观察切片 ，使松针切片在视野中心 ，换成 10X 物镜 ，观察 松针叶面横切结构。 （4 ）换成 40X 物镜观察 ，注意细胞及细胞内物质结构 ，画图。 3、 动物血液临时装片的制作及观察 （除了不用切片 ，其他类似 ） 4、 动物神经细胞永久装片的观察。 五、考点提示 ： 1、松针的叶面结构是什么样的 ？ 2、动物细胞的结构是什么样的 ？与植物细胞又什么不同 ？ 3、显微镜的物镜倍数愈大 ，视野的亮度如何 ？物体的大小如何 ？ 4、如何调节焦距 ？ 5、如何才能使切片尽量的薄 ？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。 实验二 ：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的 ： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 ，阐明实验原理—颜色反应 ， 识记和区分用于可溶 性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色 ，初步掌握鉴定上述化合 物的基本方法 ，学会描 述实验现象 ，掌握 NaOH溶液和 CuSO4 溶液的使用方法。 二、实验原理 ： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物 ，产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多 ，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。 前三种糖的分子内都含 有游离的具还原性的半缩醛羟基 ，因此叫做还原糖 ；蔗糖分子内没有 ，为非还原 糖。实验中所用的 斐林试剂 ，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖 ，而不能鉴定可溶性非还原糖。 可溶性还原糖 （如葡萄糖、果糖、麦芽糖 ）与斐林试剂发生作用 ，可生成砖红色 的 Cu 2O 沉淀。如 ： 葡萄糖 +2Cu 2+ +4OH — 加热 葡萄糖酸 +Cu 2O↓ （砖红色 ）+ H 2O 即 Cu 2+ 被还原成 Cu 2O ，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 用斐林试剂鉴定还原糖时 ，溶液变化过程为 ：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色 （直链 ）或紫 （红 ）色 （支链 ）。 2、脂肪和类脂 （磷脂、糖脂、固醇脂等 ）统称为脂类。它是构成人体组织的正 常成分 ，不溶于水而易 溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上 ，脂类属于脂肪酸的酯或与这 些酯有关的物质。 脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中 ，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中 ，脂类染色法最常用以证明脂肪变性 ，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。 脂类染色使用最广 泛的染料是苏丹染料 ，最常用的有苏丹Ⅲ ，苏丹Ⅳ ，苏丹黑及油红 O等。脂肪 被染色 ，实际上是苏 丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液 态时 ，对苏丹染料 着色效果最好。根据这一原理 ，适当提高温度 （37℃-60℃ ）对组织切片染色效 果是有好处的。 脂类染色 ，用冰冻或石蜡切片 ，以水溶性封固剂封固 ，如甘油、明胶和阿拉伯糖 胶等。 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色 （或被苏丹Ⅳ染液染成红色 ），胆脂 素呈淡红色 ，脂肪 酸不着色 ，细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用 ，产生紫色反应。 （蛋白质分子中含有很多肽 键 ，在碱性 NaOH溶液中 能与双缩脲试剂中的 Cu 2+ 作用 ，产生紫色反应。 ） 三、实验材料 ： 1、做可溶性还原性糖鉴定实验 ，应选含糖高 ，颜色为白色的植物组织 ，如苹果、 梨。 （因为组织的颜 色较浅 ，易于观察。）经试验比较 ，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色