高中生物选修3(浙科版)知识点总结.docxVIP

第一章 基因工程 一、工具酶的发现和基因工程的诞生 1、基因工程的概念： 1）广义的遗传工程 ：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。 2）基因工程： 就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们 需要的基因产物 ，或者让 它获得新的遗传性状 。基因工程的 核心是构建重组 DNA 分子 。由于基因工程是在 DNA分 子水平上进行设计和施工的，因此又叫做 DNA重组技术。 （ 3）基因工程诞生的理论基础： DNA 是遗传物质的发现过程、 DNA 双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。 2、基因工程的基本工具 1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） 来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ② 功能： 能够 识别 双链 DNA分子的 某种特定的核苷酸序列 ，并能 切割（使每一条链中 特定部位 的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开），因此 具有专一性 。 例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是 GAATTC,能在 G和 A 之间切割 DNA，如 下图所示。 黏性末端 黏性末端 ③ 结果： 能将 DNA分子切割成许多不同的片段。 备注： 不同 DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个 DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 2）“分子缝合针”—— DNA连接酶 作用：将具有末端碱基互补的 2 个 DNA片段连接在一起 （缝合 磷酸二酯键 ）形成的 D NA分子称为重组 DNA分子。 因此，DNA连接酶具有缝合 DNA片段的作用，可以将外源基因和载体 DNA连接在一起。 3）“分子运输车”——载体——质粒 1 ① 载体具备的条件 ： 1）能在受体细胞中复制并稳定保存。 2）具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA片段插入。 3）具有标记基因，供重组 DNA的鉴定和选择。 ② 最常用的载体——质粒 ： 质粒在细菌中以 独立于拟核之外 的方式 存在，是一种特殊的遗传物质，并 具 有自我复制能力的双链环状 DNA分子 。 最常用的质粒是 大肠杆菌 的质粒。 ③ 其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物 病毒 二、基因工程的原理和技术 1、基因工程的基本原理： 是让人们 感兴趣的基因（即目的基因） 在宿主细胞 中稳定和高效地表达 。 为了实现基因工程的母版，通常要有 多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞 等基本 要素，并按照一定的程序进行操作： 目的基因的获得、重组 DNA的形成、重组 DNA导入受 体细胞（宿主细胞），筛选含有目的基因的受体细胞、基因表达。 2：目的基因的获得： 即获得我们所需要的基因，如人的胰岛素基因。 1）目的基因： 是指能编码蛋白质的结构基因。 2）获得目的基因的两种方法： 目的基因的序列已知 ：用化学方法合成 目的基因。如胰岛素基因 或用聚合酶链式反应（ PCR）扩增目的基因 ② 目的基因的序列未知 ：建立一个 包括目的基因在内的基因文库 ，从基因文库中找到 目的基因 3、形成重组 DNA分子： 就是将目的基因与载体 DNA连接在一起。 通常是用 相同的限制性核酸内切酶 分别切割目的基因和载体 DNA（如质粒） ，就会在目 的基因和载体 DNA的两端形成 相同的黏性末端 ，然后用 DNA连接酶 将目的基因和载体 DNA 连接在一起，形成重组 DNA分子。 4、将重组 DNA分子导入受体细胞 用适当的方法将形成的重组 DNA分子转移到合适的受体细胞中。 常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。如用质粒作载体， 宿主细胞应选择大肠杆菌，用 氯化钙 处理大肠杆菌， 增加大肠杆菌细胞壁的通透性 ，使含 有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。 5、筛选含有目的基因的受体细胞： 并不是所有细胞都接纳了重组 DNA分子，因此需要筛选含有目的基因的受体细胞。 采用 选择性培养基 筛选。 2 6、目的基因的表达： 目的基因在宿主细胞中表达，能产生人们需要的功能物质。 三：本章总结： 基因工程就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产 物，或者让它获得新的遗传性状。基因工程的核心是构建重组 DNA分子。 DNA是遗传物质 的发现过程、 DNA双螺旋结构的确立和遗传信息传递方式的认定是基因工程诞生的理论基础，而限制性核酸内切酶、 DNA连接酶和质粒载体的发现与应用，又为基因工程的创建提供了技术上的保障。 基因工程的操作一步包括：目的基因的获得、重组 DNA的形成、重组 DNA导入受体细 胞（也称宿主细胞）、筛选含有目的基因的受体细胞核母妃基因表达。 第二章 克隆技术 一、什么是克隆 1、繁殖的方式： 1）有