生物变异与育种基因工程及其应用.docxVIP

第 8 单元 生物变异与育种 基因工程及其应用（第一课时） 一、教学目的： 通过对高考题和典型例题的研习： 复习基因工程的基本过程； 复习基因工程的基本工具，重点复习限制性内切酶和质粒的特性与应用。 二、复习思路： 先以 2008 年高考题中的基因工程题目为例题，使学生体会高考对于基因工程内容的 要求，并发现自己在学习中的问题；整堂课中，以耐盐水稻的培育过程为主线，从中分析 基因工程的基本过程和各种工具的特性及应用。 三、复习重、难点： 重点：基因工程的基本过程；限制性内切酶；质粒等运载体。 难点：限制性内切酶的特性及相关应用；质粒及重组质粒的相关探究问题。 四、复习过程： 1. 2008 年高考中的基因工程内容相关题目分析： 例 1：（全国 I-4）已知某种限制性内切酶在一线性 DNA 分子上有 3 个酶切位点，如图中箭 头所指，如果该线性 DNA 分子在 3 个酶切位点上都被该酶切断，则会产生 a、b、c、d 四种 不同长度的 DNA 片段。现有多个上述线性 DNA 分子，若在每个 DNA 分子上至少有一个 酶切位点被该酶切断，则理论上讲，经该酶 酶切后，这些线性 DNA 分子最多能产生长度 不同的 DNA 片段种类数是（ ） A.3 B.4 C.9 D.12 例 2：天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的 转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的 酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题： ⑴将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶 基因与载体拼接成新的 DNA 分子，下一步将该 DNA 分子 ，以完成 工程菌的构建。 ⑵若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ； 若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用 检测。 2. 材料：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。 我国科学家应用某些微生物的耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 试写出培育耐盐水稻的基本过程： 筛选 获取耐 盐基因 构建重 组质粒 导入  叶肉细胞 组织 培养  转基因植株 扩大 培养 耐盐水稻 1）获取耐盐基因和限制性内切酶：为从微生物体内获取耐盐基因，需要用到的基因方法是： ________________和___________________，基本工具是___________________。 例 1：下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是（ ） 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 限制性内切酶的活性受温度的影响 限制性内切酶能识别和切割 RNA 限制性内切酶可从原核生物中提取 注意点：限制酶——基因剪刀 主要存在于微生物中 识别特定的 DNA 序列（通常 4 至 6 个碱基对） 通常能形成粘性末端 机理：水解特定脱氧核苷酸之间的 3’,5’-磷酸二脂键 例 2：限制性内切酶能识别特定的 DNA 序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同 的核酸序列进行剪切。现以 3 种不同的限制性内切酶对 6.2kb 大小的线状 DNA 进行剪切后。 用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示。请问：3 种不同的限制性内切酶在此 DNA 片段上相应切点的位置是（ ） 2) 基因针线——DNA 连接酶 例 3：获得耐盐基因后，构建重组 DNA 分子所用的工具是 A. DNA 连接酶和解旋酶 B.DNA 聚合酶和限制酶 C. 限制酶和 DNA 连接酶 D.DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶 注意点：DNA 连接酶——基因针线 不识别特定脱氧核苷酸序列 合成脱氧核苷酸之间的 3’,5’-磷酸二脂键 例 4：获得耐盐基因后，构建重组 DNA 分子所用的限制 性内切酶作用于图中的 处，DNA 连接酶作用于 处。（填“a”或“b”） 3）基因的运输工具——载体： 例 5：基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限 制酶 I 的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶 II 的识别序列和切点是—↓GATC—。 根据图示判断下列操作正确的是： 注：GeneI 和GeneⅡ 表示两 注：GeneI 和GeneⅡ 表示两种标记基因 表示限制酶仅有的识别序列放大 耐盐基因 离体水稻叶片组织 GGATCC  GGATCC  目的基因  GATC GATC CTAG Gene I CCTAGG Gene II CCTAGG CTAG ．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 ．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 ．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 ．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 注意：质粒是基因工程中最常用的运载体。 思考： 质粒的特点？ 其他常用