基因功能研究方法进展 .ppt

是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。 基因打靶技术是一种定向改变生物活体遗传信息的实验手段，它的产生和发展建立在胚胎干细胞（Embryonic Stem Cell, ES）技术和同源重组技术成就的基础之上。基因打靶技术将广泛应用于基因功能研究、人类疾病动物模型的研制以及经济动物遗传物质的改良等方面。 基因打靶 同源重组 （Homologous Recombination) 同源重组是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。 Gene knockout mice Gene knockout mice 操作复杂,实验周期长,费用偏高； 重组率低； 在敲除过程中,被破坏的常常只是靶基因的部分外显子而并不是整个编码区,残留的编码序列有可能组合出新的未知的功能,这将给表型分析带来麻烦； 对于某些必需基因,敲除后会造成细胞死亡,也就无法研究这些必需基因的功能; 由于基因功能上的冗余,敲掉一个基因并并不能造成容易识别的表型,基因家族的其他成员可以提供同样的功能; 同一个打靶载体在不同遗传背景下进行基因敲除,获得的表型差异很大。 Gene knockout problems 反式作用因子的DNA结合结构域： 螺旋/转角/螺旋（Helix-turn-helix