染色体微阵列技术原理与及临床应用.ppt

微缺失/微重复类型 检测出最常见染色体 522例阳性样本中所检测出的UPD类型及疾病相关性 患者双亲评估十分必要 为降低患者父母再生育风险，对于患者父母进行相关检测，可有效指导其再次生育。 由于CMA不能检测染色体平衡易位，故核型分析和FISH技术在某些特定情况下仍具有优势。 部分染色体微缺失/微重复阳性样本按其遗传方式分类 小 结 CMA对于智力低下、发育迟缓、多发畸形等多种临床异常可有效诊断，明显优于染色体核型分析，可取代其作为遗传病诊断的一线检测手段； 对于患者双亲后续遗传学检测及分析，要选择合适的方法学，做好遗传咨询工作，对再次生育做指导。 染色体异常是导致流产的重要病因 约10%~15%妊娠会发生自然流产，其中绝大多数发生在孕早期，且50%左右是由于染色体异常所致。包括染色体数目异常占86%(包括非整倍体和多倍体)，结构异常(染色体缺失和/或重复)占6%，嵌合体占8%。（以往文献报道） 染色体芯片对流产物检测 目前流产物检测常用手段为核型分析与荧光原位杂交 (fluorescent in situ hybridization, FISH)。 核型分析：5Mb以上遗传物质改变，无法对许多具有致病性的染色体亚显微结构的变异--染色体微缺失/微重复做出检测。此外需对绒毛组织进行细胞培养，耗时较长，且容易污染。一些活性差的细胞生长受到抑制，或者母体细胞过度生长，这都会导致得不到准确核型。而临床上部分流产物已不具有细胞活性，导致培养失败。 FISH检测：可避免细胞培养，然而仅能对特异染色体数目异常进行筛查，常用探针为13、16、18、21、22、X、Y探针，无法对与特异探针结合的其它染色体数目异常进行检测，因此存在假阴性的可能。 CMA：可在全基因组范围内同时检测染色体数目异常和染色体微缺失、微重复等结构异常、嵌合体和ROHs等，无需细胞培养，实验周期短，结果更加准确可靠 非整倍体中16三体所占比例最高(20.5%)，且均在孕早期流产。 其次为Turner综合征( 14.5%)，流产可发生孕期各阶段。 绝大多数染色体非整倍体为新生突变，而D组(13,14,15)和G组 (21,22)有发生罗伯逊易位的可能，建议夫妻双方做核型分析， 排除罗伯逊易位的可能性。 孕妇年龄为发生染色体数目异常高危因素，而本文小于35岁发生 染色体数目异常导致流产占24.6% 由于染色体结构异常导致流产81.25%为反复习惯性流产，提示 夫妻双方是平衡易位(75%)，建议再次生育做PGD。 染色体内部微缺失/微重复例如DiGeorge、Williams、 Beckwith-Wiedemann等综合征流产发生在孕晚期，核型分析 无法检测。 UPD Genetic/Genomic Disorders Genomic disorders (number) Trisomy 21 Trisomy 18 Trisomy 13 Mosaic trisomies of other chromosomes Genomic disorders (structure) More than 400 known disorders Monogenic disorders Dominant (4,000) Recessive (3,000) Multigenic disorders Genes + Environments 二.遗传病常见诊断方法及比较 遗传病的诊断 染色体核型分析Karyotyping 荧光原位杂交 Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) 染色体微阵列技术Chromosomal microarray analysis (CMA) 测序技术 First-generation-Sanger method Novel sequencing techniques 传统核型分析技术 除了染色体非整倍体，染色体微缺失和微重复等基因组失衡是导致胎儿发育迟缓、畸形和其他先天性疾病的主要原因。 Structural variation in the human genome and its role in disease[J]. Annu Rev Med. 2010,61:437-55 是目前较为成熟的遗传性疾病诊断技术 传统核型分析技术 绒毛活检取材 孕中期羊膜腔穿刺羊水 细胞培养 染色体核型分析 染色体数量变化、平衡、不平衡易位、转位和显微镜下 可见的大片段缺失和重复。 核型分析局限性 材料受限，需要新鲜的组织、血样进行活细胞培养 不能分辨长度在10Mb以下染色体片断的缺失、重复或