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*pH对微生物的影响 陈燕飞 (太原师范学院生物系,山西太原030012) 1摘要2 溶液的酸碱度通常以氢离子浓度的负对数(即pH)来表示,培养基 或环境中的pH对 于微生物的生命活动有着密切的联系外,它的影响也是多方面的,因为环 境的pH会影响到细胞膜 所带的电荷,从而引起细胞对营养物质吸收状况的改变.此外,还可以通过 改变培养基中的有机化 合物的离子化程度,而对细胞施加间接的影响,改变某些化合物分子,进入 细胞的状态,从而促进或 抑制微生物的生长.微生物通常可以在一个较宽的pH范围内生长,但都有 一个最适pH,在最适 pH范围内酶活性最高,如果其他条件适合,微生物的生长率也最高. 1关键词2 微生物;p长H;生 1文章编号2 167222027(2009)032012 1204 1中图分类号2 Q936 1文献标识 码2 A 微生物学作为一门学科,是在19世纪中期才发展起来的.这是因为当时在 欧洲一些国家中, 占有重要经 济地位的酿酒工业和蚕丝业发生了酒变质和蚕病危害等问题,促进了微 生物的研究, 以法国科学家Pasteur 和德国科学家Koch为代表,他们研究了微生物的生理活动,并与生产和预 防疾病联系起来,为微生物学奠 定理论和技术基础[1].现在人们对微生物的开发利用,不仅仅限于食品和 医学方面,而是已经扩展到能源工 业!冶金工业!化学工业!农业!林业!牧业以及环境保护等许多国民经济和 人民生活的重要领域[2].在能源方 面,提高石油产量,可利用微生物或微生物的某些产品进行三次采油;在冶 金方面,利用微生物浸出法,从贫 矿或尾矿的矿石中溶取铜!铀!锰!锌!锑等,是一项颇有成效的技术[3];在化 工方面,利用微生物生产各种醇 类!有机酸!多糖!脂肪!氨基酸!维生素!抗生素!激素!和酶制剂等;在环保方 面,利用微生物的降解作用处理 废水!废物,消除污染!保护环境[4];在农业方面,微生物的利用更加广泛,尤 其是生物固氮的研究,将来有可 能使人类模拟生物固氮生产化肥,或利用微生物固氮基因让农作物获得 固氮能力成为现实,这将会给农业带 来一次革命性的变化[5].微生物与人类息息相关,它对人类的假定贡献和 无法估量的开发潜力,为我们展开 了广阔的应用前景,所以研究微生物的生命活动有着重要意义,其中pH与 微生物的生命活动有密切联 系[6].为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献,将进一步探究pH 对微生物的影响. 1 基本原理 pH对微生物的生命活动有很大的影响,主要通过几个方面实现:一是使蛋 白质!`核酸等生物大分子所 带电荷发生变化,从而影响其生物活性;二是引起细胞膜电荷变化,导致微 生物细胞吸收营养物质能力改变; 其三是改变环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性.不同微生物对 pH条件的要求各不相同,它们只能 在一定的pH范围内生长,这个pH范围有宽!有窄,而其生长最适pH常限于 一个较窄的范围,对pH条件 的不同要求在一定程度上反映出微生物对环境的适应能力.本实验选用 大肠杆菌!金黄色葡萄球菌!酿酒酵 母,分别在pH为3!4 !7!9的培养基中培养,用比浊法测定菌液浓度[7]. 比浊法原理是在一定范围内,菌悬液中细胞的浓度与混浊度成正比,即与 光密度成正比,菌越多,光密度 越大.因此用分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度, 以光密度 (即OD值)表示菌量. 2 器材与试剂 2.1 菌种 *收稿日期17 作者简介:陈燕飞(19712),女,山西万荣人,硕士研究生,太原师范学院生物 系副教授,主要从事微生物与免疫研究.大肠杆菌!金黄色葡萄球菌!酿酒酵 母菌种各一支. 2.2 溶液或试剂 无菌生理盐水!牛肉膏!蛋白胨!NaCl!0.1mol/L 的HCl和NaOH溶液. 2.3 仪器或其他用品 酸度计!酒精灯!高压灭菌锅!分光光度计!天平!试管!无菌吸管等. 2.4 培养基的配置 本实验用牛肉膏蛋白胨培养基[8].其配方如下: 牛肉膏 3.0g 蛋白胨10.0g NaCl5.0g 水1000mL 1)称量 按培养基的配方比例依次准确的称取牛肉膏!蛋白胨!NaCl放入烧杯中. 2)溶化 在上述烧杯中先加入少于所需的水量,用玻璃棒搅匀,然后在石棉网上加 热使其溶解,待药品完全溶解 后,补充水到所需的体积. 3)调pH 取配好的培养基各50ml于四个小烧杯中.用酸度计分别调其pH为3!5!7!9. 4)分装 取pH为3的培养基各5mL于11!2 1!31号试管内; 取pH为5的培养基各5mL于12