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一道关于基因工程的高考试题评析 浙江省绍兴县柯桥中学　叶建伟 摘 要 基因工程是高中生物教学的重点和难点，理解重组质粒的相关知识是突破难点的关键所在。本文以高考试题评析的形式，辨析重组质粒的疑难问题，旨在为以后的高三复习备考提供参考。 关键词 重组质粒 辨析 限制性核酸内切酶 目的基因 例题（2011年高考理综浙江卷第6题）将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 参考答案：C 考生对A选项基本没有异议，因为题干中说明了ada已在大肠杆菌细胞内成功表达，说明大肠杆菌细胞内必定含有携带ada的重组质粒，故A选项表述的含义正确。B、C、D三个选项在师生中引起广泛争议，甚至有人认为试题存在科学性错误。下面是一些具有代表性的错误观点和笔者对相关疑难问题的阐述。 1 重组质粒是否含有限制性核酸内切酶识别位点 认为B选项表述的含义是错误的原因分析：目的基因和质粒能够形成重组质粒的关键是目的基因和质粒被限制性核酸内切酶切割后具有相同的粘性末端。形成相同的粘性末端可以采用两种方法：①用相同的限