细菌学卫生检验种类及标准.pptVIP

* * 第七章 细菌学卫生检验种类及标准 主要内容 第一节 体液、分泌物及排 泄物细菌学检验 第二节 各种环境标本细菌学检 验及卫生标准（自学） 临床感染性疾病的诊断和治疗 应用良好的检测技术和方法，提供准确的结果或报告 确定检查目的和方法 正确规范的采集和运送标本 临床检验流程 第一节 体液、分泌物及排 泄物细菌学检验 细菌学鉴定方法 1、形态结构检查 2、细菌生长特性检查如菌落 3、生化试验 4、血清学试验 5、药敏试验 6、细菌毒素检测 7、分子生物学检测 8、噬菌体分型试验 9、动物试验 临床标本常规细菌学检验程序 标本选择 标本采集与运送 观察标本、前处理 直接涂片 快速检验 分离培养 增菌培养 可疑菌落 血清学鉴定 药物敏感试验 生化反应 形态观察 结果报告 细菌学检验报告原则 分级报告 一级报告：直接涂片染色结果及培养结果 二级报告：分离培养及药敏结果 三级报告：细菌种属、药敏结果、结果评价和建议 无菌原则 正确采 样时间 正确采 样部位 足够样本量 多样性采集 做好记录 一、血液标本细菌学检验 二、脑脊液标本细菌学检验 三、穿刺液和引流液标本细菌学检验 四、尿液标本细菌学检验 五、脓液和分泌物标本细菌学检验 六、痰液标本细菌学检验 七、生殖道标本细菌学检验 八、粪便标本细菌学检验 一、血液标本细菌学检验 种类 常见病原菌 G+球菌 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌 G+杆菌 结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌 G-球菌 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌 G-杆菌 大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌 真菌 念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌 厌氧菌 拟杆菌、产气荚膜梭菌 （一）血液标本的采集与送检 1. 采样时间：发热期、用药之前、 病情发展 2. 采样部位及频率：多部位、高频率 例1：亚急性心内膜炎：24h内在三个不同部位采集3次血标本，两次间隔不少于15分钟，如培养阴性，就再采3次血标本。 例2：急性脓毒血症：在10分钟内在不同部位采2～3次血标本。 3. 样本采集的量：成人血量5～10ml，婴儿1ml～2ml，儿童3ml～5ml；当怀疑为真菌感染时，应采集双份量，分别作双相培养(37℃/28℃)。 4. 样本的送检：尽快，室温 5. 操作：直接采血注入含増菌肉汤的培养瓶或用不含防腐剂的肝素抗凝管至实验室接种，需同时做需氧和厌氧培养 血培养 一级报告 二级报告 三级报告 “检出***菌”，药敏试验结果； 7天仍无生长现象，报告为“7 天培养无细菌生长”（结核可 培养8周报告阴性） （二）细菌学检验 （一）标本的采集与送检 1. 采样：腰椎穿刺术无菌采集脑脊液3-5ml，床边接种或放入无菌试管中，立即送检（采样到送检不超过1h）； 2.注意保温，不可置冰箱保存，因为会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌； 3、脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫 培养基选择：普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿等。 二、脑脊液标本细菌学检验 （二）细菌学检查? 1．涂片检查：革兰染色：查找一般细菌，尤其脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和链球菌多见。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。墨汁染色：查找新型隐球菌。 2．细菌培养：脑脊髓液培养多数需3～4天，在此期间如有细菌生长，经鉴定报告“××菌”，同时报告药敏试验结果。 床边接种 离心涂片，同时增菌 不染色镜检 革兰、抗酸、墨汁染色 单菌落涂片染色 离心沉淀物或増菌培养物 脑脊液 报告单 三、穿刺液和引流液标本细菌学检验 （一）标本的采集与送检 1、标本来源：胸腔积液、腹水、心包积液、关节液、胆汁、鞘膜液深部组织液等 2、标本量：心包积液、关节液为1-5ml，胸腔积液、腹水为5-10ml 3、收集送检：无菌收集并置于无菌抗凝试管送检，无法立即送检可冷藏；标本还可床边接种或置厌氧运送培养基内送检，无法立即送检可室温保存。 （二）细菌学检查 1、标本处理：①浆液离心沉淀物涂片；②脓液直接涂片；③含血细胞，加等量蒸馏水破坏红细胞后，离心沉淀物涂片 2、涂片检查：这类标本因原部位是无菌的，只要检出细菌即可诊断感染的类型，故直接涂片很重要。革兰染色：查找一般细菌。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。 3、分离培养及鉴定：离心沉淀物分别接种增菌肉汤、血琼脂平板、中国蓝或麦康凯琼脂平板、厌氧血琼脂平板。如有细菌生长，需进一步鉴定和药敏试验后报告。 四、尿液标本细菌学检验 （一）标本的采集与送检 1、采集方法：防止尿液被尿道口菌群污染，采用中段尿采集法、导尿法和膀胱穿刺法采集标本 无菌导尿管采集尿液，在排出15