痰液及下呼吸道分泌物培养简易操作规程.docVIP

、痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程 1 观察标本合格后操作。一般为晨痰，再留取痰之前刷牙、反复漱口，应从气管深部咳出痰，吐进无菌容器内送检。涂片白细胞小于10，上皮细胞大于25为不合格痰，相反白细胞大于25，上皮细胞小于10-25为合格痰标本。 2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。 3 接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板 、中国兰平板（或麦康凯平板 上）。 平板划线分离培养： （1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二 三区依次用接种环划线。 （2）每划一区域应将接种环烧灼一次 ，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。 （3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35° 4观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌 、阴性菌 、球菌还就是杆菌后 鉴定种属。 5 做药敏试验-------报告结果。 便培养标准操作流程 1、收取有粘液或 脓血、稀水粪便标本。 2、点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。 3、接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板 、SS平板、中国兰平板（或麦康凯平板上）。 平板划线分离培养： （1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二 三区依次用接种环划线。 （2）每划一区域应将接种环烧灼一次 ，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。 （3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养。 4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌 、阴性菌 、球菌还就是杆菌后 鉴定种属。 5 做药敏试验-------报告结果。 尿培养标准操作流程 1 收取晨尿第一泡清洁中段尿。（把外阴用肥皂清洗一遍，再用清水清洗两遍，待干或用干净布擦干）用导尿管得病号需新换导尿管后取标本 2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。 3 接种环灭菌—待冷却后将标本混匀，用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环）—接种到血平板 ，接种环灭菌---待冷后取标本接种到中国兰平板（或麦康凯平板上）。(抗菌素治疗患者应增加一个10ul接种。) 4 平板单区划线法：用灭菌接种环在血平板与中国兰（或麦康凯）平板得中间位置单区划线（这种方法适合菌落计数，假如细菌多不容易分出单个菌落。） 5划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35° 6观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌 、阴性菌 、球菌还就是杆菌后 鉴定种属。 7 做药敏试验------报告结果。 注：接种1ul尿量者，菌落数乘以10，接种10ul尿量者，菌落数乘以100、即为每ml尿液中所含有得细菌数（CFU/ml）,如菌落数生长过多无法计数则报告大于100000 CFU/ml、 分泌物培养标准操作流程 1 在 无菌环境下用一次性拭子快速取分泌物或脓液标本。 2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。 平板划线分离培养： （1）用拭子将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二 三区依次用接种环划线。 （2）每划一区域应将接种环烧灼一次 ，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。 （3划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小时。 3观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌 、阴性菌 、球菌还就是杆菌后 鉴定种属。 4 做药敏试验—— 报告结果。 穿刺液培养标准操作流程 1 收取合格得穿刺液标本。（咨询下就是否按要求取得标本） 2 点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。 3 将穿刺液接种到增菌培养液进行培养。（穿刺液含细菌数量较少，因此，必须做增菌培养） 4 培养18-24小时候后，用酒精消毒培养液瓶口，用五毫升注射器抽取0、5毫升液体打入血平板 、巧克力平板（CO2环境中以分离嗜血杆菌）中国兰平板（或麦康凯平板上） 接种环灭菌—待冷却后。 平板划线分离培养： （1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二 三区依次用接种环划线。 （2）每划一区域应将接种环烧灼一次 ，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。 （3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小时。 5观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌 、阴性菌 、球菌还就是杆菌后 鉴定种属。 6 做药敏试验-------报告结果。 注 ：标本经增菌转种平板后，经35°C24-48小时孵育后，如无细菌生长，平板还应继续孵育至第3天、如怀疑有奴卡菌，平板应持续孵育7天证实无菌生长，才能报告阴性、 血培养标准操作流程 1 用严格无菌技术静脉采血法采集2套外周血，作培养标本。