正交法研究黄芪桂枝五物汤中总黄酮的提取工艺 开题报告.docVIP

本科毕业论文开题报告 题目：正交设计对复方黄芪桂枝五物汤中 总黄酮的提取工艺的研究 题目来源背景（现状、前景） 1.国内外研究现状 中药为我国传统医药悠久历史，中药以其低价优效，在疾病的预防与治疗，身心的保健与康复中发挥着越来越大的作用，“回归自然”、崇尚天然药物正在成为一种世界性潮流。当今中药复方研究方兴未艾，中药复方药效物质的基础研究与作用机理及配伍规律在我国已正式启动。自实行《新药审批办法》以来，已有1100种中药新药通过注册，批准生产700多种。中药制剂也由原来的丸散膏丹发展到60多种。选择常用名方或一组类方为研究对象，已成为一种趋势。目前国际上对黄酮类化合物的研究开发也十分活跃，其产品的种类很多，在国际上的销售额已达10亿美元以上。国内外相继开发出多种药品和保健品。所以对黄酮提取工艺的研究意义重大。 黄芪桂枝五物汤出自《金匮要略》，为治血痹而设，其药物组成为黄芪、桂枝、芍药、生姜、大枣。其用药精当，组方严谨，配伍巧妙，长期以来，备受中医学者的青睐，已成为临证司用之名方。有文献显示，该方可治疗神经系统的疾病就大于三十多种。但目前尚未有人研究此方的药效物质的基础、作用机理及配伍规律。现代临床应用显示，该方具有较广泛的适应症和较好的临床疗效，尤其是在治疗颈椎病、类风湿和脑中风后遗症方面。 2、前景 目前对于单味药的化学药理研究较广泛深入，但对于复方制剂的提取的最佳工艺尚有很大空白，黄芪桂枝五物汤中总黄酮作为一种功能成分，其主要作用有：抗肿瘤，延缓衰老，增强心血管功能，治疗慢性前列腺炎，增强免疫力，调解内分泌系统，护肝，抗炎、抗过敏．抑菌、抗病毒等。 黄芪桂枝五物汤是以黄芪为君药的复方，尚未见到供临床应用的新剂型，所以．加快对黄酮类物质提取工艺的研究，进一步采用一些高新技术及先进的生产工艺是一个方向，当然，在这方面要做的工作还很多。 二、主要研究内容、应用价值、改进及创新 1、主要研究内容与价值 目前对黄酮的研究非常多，已有的文献资料中对单味药材的黄酮提取方法也比较成熟，但少见有复方制剂中总黄酮类提取工艺的研究报道，然而中药在临床处方或是工业大规模生产中的复方应用更为普遍，故本试验对黄芪桂枝五物汤总黄酮的提取工艺以及含量进行初步研究，应用本课题为对其进行正交试验设计得出科学的实验方案，从各方案中测得黄酮含量并进行比较并筛选出最佳提取工艺，研究黄芪桂枝五物汤不同提取工艺对总黄酮含量的影响，建立有效成分总黄酮的多指标质量控制方法，通过大量提取黄酮类化合物，为课题下一步运用均匀设计法采用药理实验模型对黄芪桂枝五物汤中总皂苷、总黄酮、总多糖、总挥发油四种有效成分及配伍进行药效学比较，筛选出该方的针对各病症的有效部位及其最佳配伍比例做基础准备工作。以期在不同层次上探讨有效成分群及有效成分群配伍与药效作用的相关性。同时该试验结果也可为医药品、化妆品、食品做基础，也必将有广阔的前景。以求解开中医学在临床应用，及中药工业化，新剂型开发方面的基础问题，充分体现了其重要价值，实用性和可行性，必将黄芪桂枝五物汤配伍研究推向更深层次，从而为研制高效低毒、成分基本清楚、作用靶点明确的创新型药物奠定基础对中药的现代化和中药新药的开发有重大的意义。 2、创新性 首次对复方制剂黄芪桂枝五物汤中总黄酮的提取工艺进行研究，优化工艺，并 运用正交设计法研究不同因素搭配对总黄酮提取量的影响，方法具有创新性。 拟采用的研究方法、手段及实验准备情况 1、整体思路 计划以乙醇浓度（60%、70%、80%三个梯度）、粉碎粒度（粗粉、中粉、细粉三个梯度）、回流提取时间（30min、60min、90min三个梯度）为考察因素，用乙醇回流提取法，分别回流2次，合并提取液，然后用水饱和乙酸乙酯萃取3次，挥干乙酸乙酯得浸膏，浸膏溶于水中致所需浓度，以芦丁作基准物质，用紫外分光光度法，以样品中总黄酮含量为测定指标，采用正交试验优化五物汤中总黄酮的最佳提取工艺。 2、具体步骤： (1)标准曲线的绘制：精密称取烘干至恒重的芦丁标准品配成0.2 mg/ mL 的对照溶液,分别量取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL ,各加70%乙醇至5.0 mL ,于510 nm 处测其吸光度值, 再以标准溶液浓度为横坐标，吸光度为为纵坐标绘制标准曲线。得到线性回归方程，及线性范围。 (2)样品的制备：将原材料以乙醇浓度（60%、70%、80%三个梯度）、粉碎粒度（粗粉、中粉、细粉三个梯度）、回流提取时间（30min、60min、90min三个梯度）具体见下表，考察3个因素,3个水平，选用L9正交试验设计表对原材料进行回流提取实验分别回流2次，合并提取液，然后用水饱和乙酸乙酯萃取3次，挥干乙酸乙酯得浸膏，浸膏溶于水中致所需浓度，以芦丁作基准物质，用紫外分光光度法，测量吸光度，再代入标准曲线回