2020年坦布苏病毒简介.pptxVIP

学 海 无 涯 坦布苏病毒简介;学 海 无 涯 同，3’非编码区还含有一个 poly（A）尾，包括起始、调节基因组复制和转录的保守二级 或三级 RNA 元件。5’非编码区由 94 个核苷酸构成，在黄病毒属中该结构保守性较差，其 主要功能是在RNA 复制过程中作为正链合成的起始位点。病毒基因组的开放性阅读框（ORF） 包含 10230 nt，编码一个大多聚蛋白，由 3426 个氨基酸构成，可以裂解为 3 个结构蛋白（C、 M、E 蛋白）和 7 个非结构蛋白（NS1，NS2A，NS2B，NS3，NS4A，NS4B，NS5）(Mukhopadhyay, S et al.,2005)。E、NS1、NS3、NS5 蛋白具有保守性和抗原性。C 蛋白的氨基酸同源性低，含 有大量的碱性氨基酸，参与病毒组装过程。E 蛋白是 DFV 主要表面蛋白，具有促使病毒与宿 主细胞结合及膜融合功能，能诱导产生中和抗体。DFV 的非结构蛋白NS1 是黄病毒中最大的， 是病毒感染过程中产生的主要免疫原，但 NS1 免疫不能诱导无明显的抗病毒抗体产生，发 生抗体增强效应的可能性较小(Tang Y，et al.,2011)。NS3 蛋白具有丝氨酸蛋白酶、核苷三磷 酸酶/RNA 解旋酶活性，参与蛋白质水解加工及病毒复制，与病毒的致病性密切相关(郑杰， 2007)。NS3 与 NS2 组成病毒复制体，感染动物可产生抗 NS2-3 抗体，但抗 NS2-3 抗体不具 有病毒中和活性(郑杰，2007)。基因组 RNA 就是 DTMUV 特异性RNA，具有感染性、携带全 部遗产信息、在病毒增殖过程中，直接起 mRNA 作用，既可复制子代 RNA，又可翻译出病 毒蛋白。 2.2 生物学特性 TMUV 对乙醚及去氧胆酸盐敏感。56℃加热 15 分钟灭活。最适 pH 为 8.0-8.5，pH10 以 上使其灭活。对酸敏感。TMUV 在胰酶处理后，感染性丧失。鸭坦布苏病毒可以在鸭胚、鸡 胚、鸭胚成纤维细胞及部分传代细胞系如 Vero 细胞中繁殖。将鸭坦布苏病毒经尿囊腔接种 鸡胚和鸭胚，3-5d 后可致鸡胚和鸭胚死亡。接种 CEF 盲传 5 代不会产生病变，而将鸭源胚 毒第 1 代接种 DEF 就在 48h 出现了明显 CPE。适应 DEF 后的病毒，通常在 36-48h 就会产生 CPE，随时间延长，CPE 会更加明显，表现为细胞圆缩和脱落，细胞折光性增强，细胞变圆 以及细胞融合，最终崩解死亡。通过 H.E.染色便可见细胞破碎，并有大量红染颗粒。通过 RT-PCR 检测，接种病毒的CEF 为阴性，而接种DEF 后检测为阳性（李玉峰等，2011）。 3 鸭坦布苏病毒的研究现状 1997 年，温立斌等(温立斌，2001)从石家庄、邢台、邯郸等地发现康贝尔鸭产蛋下降， 有神经症状，分离到有囊膜 RNA 病毒，经初步鉴定，疑似黄病毒，初步命名为“鸭病毒性 脑炎”。曹贞贞等(曹贞贞，2010)于 2010 年将种鸭和蛋鸭发病死亡病例暂命名为“鸭出血性 卵巢炎”。2011 年，苏敬良、高福等(苏敬良等，2011)经过大量的研究工作，测序分析将其 命名为白洋淀（BYD）病毒。李玉峰等(李玉峰，2011)发现，除种鸭外，商品肉鸭也发病。;学 海 无 涯 黄欣梅等(黄欣梅，2011)报道鸭鹅均发病，将其命名为“脑炎-卵巢炎综合征”。 随后，傅光 华等(傅光华等，2011；黄欣梅，2011)报道本病在蛋鸡、鸡群中发现。 截至 2011 年 12 月 15 日，GenBank 数据库收录了 9 株鸭源、1 株鹅源、1 株鸡源共 11 株 DTMUV 的基因序列。;学 海 无 涯 ;学 海 无 涯 一步法 Real-time RT-PCR 检测方法 (Yun, T et al., 2012)、RT-LAMP 检测方法(Tang, Y et al., 2012) 和间接 ELISA 法(姬希文等, 2011)等。 实验室诊断 鉴于对鸭坦布苏病毒病的研究还不够深入，目前实验室用于检测鸭坦布苏病毒病的病原 的方法不是很多，但是每一种都有自身的优缺点。常规的检测方法主要是血清学方法，包括 中和试验、血凝试验、琼脂免疫扩散试验、荧光抗体技术、酶联免疫吸附试验以及分子生物 学实验等。 血清中和试验(Virus-neutralization test, VN) 中和试验是目前最常用、最可靠的方法，是公认的一种权威方法。通常在鸡胚上以固定 血清-稀释病毒法进行，也有人在鸭胚、雏鸭或病毒适应细胞中进行试验。就目前而言，此 病的中和试验的孵育温度、病毒量等的最佳条件的研究，还未见报道。利用中和抗体进行的 空斑减少试验，微量中和试验也未见报道。中和试验虽是普遍认为的权威诊断方法，但其繁 琐、费时、成本高，不