神经毒理学方法.pptxVIP

神经毒理学方法;神经毒理学;;传统毒理学研究方法;;神经毒理学研究方法;神经行为功能评价方法;具体方法如下：;二、神经行为功能测试组合 1、FIOH测试组合 （ Finland‘s Institute of Occupational Health,芬兰职业卫生研究所 ）测试组合 2、WHO-NCTB测试组合 WHO选定的神经行为核心测试组合（neurobehavioral core test battery,NCTB） 3、NES方法 神经行为评价系统(neurobehavioral evaluation system)是1986年Lets和Baker提出的一组利用计算机进行测试的测试组合。;三、学习和记忆功能测试 （一）、人体试验 韦克斯勒记忆量表、韦克斯勒成人智力量表和临床记忆量表主要用来测试人的认知和记忆的能力。 （二）、动物试验 1、小鼠Y型迷宫实验 2、小鼠跳台实验 3、小鼠避暗实验 4、大鼠穿梭实验（双向回避实验） 5、小鼠水迷宫实验;四、运动功能测试 （一）、人体试验 手提转速度试验 目标瞄准追击试验 简单反应时间试验 （二）、动物试验 活动度测定 运动协调功能测试 痛觉测定;神经毒性评价方法; 可使用光镜、电镜、激光扫描共聚焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交法，受体定位法、荧光素示踪技术和放射性核素示踪技术对神经系统进行形态学观察和功能活动形态定位。 如：1998年阮素云报道了低浓度铅对大鼠血脑屏障超微结构的损害； 2001年赫秋月报道了丙烯酰胺对小鼠小脑浦肯野细胞的病理改变；2003年杨芳报道不同浓度锂对大鼠原代培养大脑皮层神经元的影响。 ;二、生理与生物化学方法 目前应用脑内微透技术，微穿技术，磁共振光谱技术，高效液相色谱法，免疫印迹法，放射免疫分析法等测定神经中枢神经递质的释放量及其变化。 如：2003年李红玉报道了电磁辐射对大鼠海马氨基酸类神经递质水平的影响；胡卫萱报道了甲基汞对脑组织有极大的亲和性，2008年Yumi等发现组氨酸可减少脑水肿面积的增加 ;三、神经电生理学方法 神经电生理学指标在实验和人群的临床研究中都得到了较为广发的应用，可使用脑电图，感觉诱发电位，肌电图等测试神经系统的电活动，离体的单个神经细胞可用斑片钳和膜片钳技术评价单个细胞的单个离子通道及其受体的电活动。 如：2002年阮迪云应用膜片钳技术和原位杂交技术研究了铅对钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响；2003年桑楠等报道了二氧化硫衍生物对大鼠海马神经元外向钾电流特性的影响。 ;四、分子生物学方法 神经生物学研究中常用的分子生物学方法有基因的分子克隆，克隆后的基因在人工体外系统或细胞中的表达，PCR扩增核酸分子技术，原位杂交技术，基因芯片等。 如：2002年张增利报道了农药对小鼠脑细胞组织c-fos、c-jun、mRNA 表达的影响；2002年逯晓波报道了铅对幼鼠海马区Bcl-2、Fas 蛋白表达的影响；2004年丁晓蓉综述了基因芯片与脑衰老的研究进展。;五、脑成像技术 脑成像技术很多，有颅骨X射线成像技术、同位素脑扫描、计算机断层扫描、核磁共振成像、正电子发射断层扫描术及单光子发射计算机断层摄影等。 如1997年姜锋杰报道了慢性锰中毒颅脑CT的改变，为锰中毒的诊断提供了新的参考依据。;行为发育毒性测试方法; 可以说，神经毒理学的研究方法很多，任何研究神经科学的方法如神经生物学、神经生理学、神经生化学、神经病理学、神经药理学、分子神经生物学等方法都适用于神经毒理学。; 虽说神经毒理学的研究方法很多，但是这些方法是互为补充的，有些指标也只有在结合其他相关指标时才能很好地予以解释，实际上，由于神经系统的复杂性，单一的指标是不可能全面评价神经毒性，因此将不同指标组合起来进行成套实验是神经毒性评价的主要研究方向。;此外，我个人认为神经毒理学研究方法还可根据试验的样本来源分为： 一、人体研究 二、动物实验 三、离体组织或细胞实验;就人体研究而言，其研究方法与动物实验，离体实验有明显的不同，除了对一些特殊的志愿者研究外，所有的神经毒效应不能采用人体进行研究。只能在接触某些神经毒物或中毒后进行某些神经系统功能的临床观察和检测；测定外周血、尿等替代指标，作为评价接触神经毒物的生物标志物；死后的组织病理学检查。